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- 2026年01月16日
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实验服务
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伊莱博生物科技（上海）有限公司
western blot是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹（western blot）具有
SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性，现在已成为蛋白分选的一种常规技术。免疫印迹（western blot）常用
于鉴定某种蛋白，并能对蛋白进行定性和半定量分选。
western blot一般步骤：蛋白质抽提，蛋白质定量，变性聚丙稀酰胺不连续凝胶电泳（SDS-PAGE），蛋白质转移，western blot膜的封闭和抗体孵育，western blot结果检测，western blot数据分析，提供实验报告。
western blot服务内容：专业的队伍，提供完整的实验步骤和结果，提供专业的数据分析，提供电子版扫膜结果，以及灰度值分析。风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
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文献和实验免疫印迹又称蛋白质印迹（Western blotting），是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中 的某种蛋白的方法。其基本流程是先将待检测样品溶解于含有去污剂和还原剂的溶液中，经过 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)分离各组分，然后通过印迹技术把分离样品几乎原位、定量转 移到 NC 膜上。随后用特异抗体与 NC 膜上的靶抗原反应，结合上的抗体可用与辣根过氧化物 酶或碱性磷酸酶偶联的抗免疫球蛋白进行反应，最后通过与酶的底物发生显色反应来做检测。 由于免疫印迹具有 SDS
western blot是现在实验技术中较常用但又不好控制的实验技术。近一月，一直在攻克这个高地，目前尚在努力中，有些心得想给大家聊聊。希望对大家的实验有点点帮助。1)蛋白提取和定量：A.组织蛋白提取过程中，匀浆是一个多因素影响的过程，除了根据实验目的要加入各种蛋白酶抑制剂、磷酸酶抑制剂等之外，匀浆操作本身也有讲究。在其他条件都一致的情况下，匀浆操作尽量是一个人进行（手法一致，否则蛋白浓度和含量有差异）。B.所提取的蛋白，要注意分装、低温保存，或者100度加热制备成样品。C.蛋白定量，采用
要。但是在做WB实验的7、8个月过程中，我的核心的一个蛋白一直处于混沌状态，可能跑30次能现身一次，现身之后又没影好几个月，就这样捉摸不定，搞得我很烦，但又无可奈何。询问了实验室的同学们，说法各一：1、有人说小分子量蛋白就是难跑，为什么难大家也说不清楚。2、有的说分泌性蛋白本身胞内含量少，不好跑，需要加大上样量，似乎也是实话。3、还有的说小分子量蛋白容易降解，你的蛋白质降解了吧，我姑且信了。但是95%的时候我跑出的条带都是大白板，纵然我通过PCR、细胞的免疫荧光都能够发现这个蛋白，但是就是WB做不出
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