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北京绿百草
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文献和实验(2-莰醇)的极性,选择了弱极性的色谱柱(OV-101)来替代原方法中的中等极性色谱柱(PEG-20M或PEG-2M),同时将内标物选为正十二烷(原方法为正辛烷或正十七烷),结果冰片出峰时间提前,内标峰与冰片峰不仅能完全分开,而且相距仅1分钟左右,6分钟即可完成一次分析测定。而原方法中冰片峰与内标峰间隔约7分钟,分析时间长达20分钟。经过多次实验证明,改进后的方法比原方法快捷,而且分离效果更佳。在本文选定的色谱分析条件下,内标物与冰片浓度比为1∶0.3~1∶1.5时峰面积与浓度线性关系,所绘制的标准
内的,而酶只有在甘油浓度 具体操作如下:在 1.5 mL 离心管中依次加入DNA(1 μg/μl)20 μg10× 酶切 buffer 4.0 μl限制性内切酶(10 U/μl)5.0 μl加 ddH2O 至 500 μl在最适温度下消化 1-3 hr。消化结束时可取 5 μl 电泳检测消化效果。如果消化效果不好,可以延长消化时间,但超过 6 hr 已没有必要。或者放大反应体积,或者补充酶再消化。如仍不能奏效,可能的原因是 DNA 样品中有太多的杂质,或酶的活力下降。消化后的 DNA 加入 1/10
Yeast Transformation Using Frozen Competent Cells and Single-stranded DNA as a Carrier
Tris-HCl pH 8.0 1 M Lithium acetate pH 7.5 0.2 M EDTA pH 8.0 1X TE-LiAc 10 mM Tris-HCl pH 8.0 1 mM EDTA 0.1 M Lithium acetate PEG-TE-LiAc 40% PEG-4000 10 mM Tris-HCl pH 8.0
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