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100
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上海远慕生物科技
- 规格:
250g
货号:YM-BG01537
保质期: 24个月
供应疱肉牛肉粒【培养基配制】
先计算所需培养基之份量 (体积),依已商品化培养基产品上之指示称取所需克数,并加入蒸馏水。
1)搅拌均匀后,于微波炉中加热数分钟将所有成份溶解后
2)利用分注器进行分装(切勿锁紧盖子!)。接著放入杀菌釜中进行灭菌工作
3)若是配制slant 则需于灭完菌后趁 培养基未凝固前锁上盖子并斜放 (可用厚书辅助);若是配置broth或deep agar 可等其冷却后再锁紧盖子,并放入4℃冰箱中保存备用。
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供应疱肉牛肉粒【培养基种类与基本成分】
1)氨基酸是组成蛋白质的基本单位。不同种类的细胞对氨基酸的要求各异,但有几种氨基酸细胞自身不能合成,必须依靠培养液提供,这几种氨基酸称为必需氨基酸。其中谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡。因此,各种培养液中都有较大量的谷氨酰胺。但是,由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置于-20℃冰箱中保存,在使用前加入培养液内。已含谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱中储存2周以上时,还应重新加入原来量的谷氨酰胺。
2)碳水化合物是细胞生长主要能量来源,其中有的是合成蛋白质和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脱氧核糖、丙酮酸钠和醋酸等。
3)培养液中无机盐的主要功能是帮助细胞维持渗透压平衡。此外,通过提供钠、钾和钙离子,帮助细胞调节细胞膜功能。培养液的渗透压是一个非常重要的因素,细胞通常可耐受260mOsm/kg 320 mOsm/kg。标准培养液的渗透压在此范围内波动。特别注意:向培养液中加入其它物质有可能会明显改变培养液的渗透压,特别是溶于强酸或强碱中的物质。向培养液中添加HEPES时需按以下方法调节钠离子浓度。
4)大多数细胞所需pH 在 7.2 - 7.4。但是,细胞培养最适pH值随培养的细胞种类不同而不同。成纤维细胞喜欢较高pH (7.4 - 7.7),而传代转化细胞系则需要偏酸pH (7.0 - 7.4)。由于多数培养液靠碳酸氢钠(NaHCO3)与CO2体系进行缓冲,因此,气相中的CO2浓度应与培养液中碳酸氢钠浓度相平衡。如果气相或空气中CO2浓度设定在5%,培养液中NaHCO3的加入量为1.97g/L;如果CO2浓度维持在10%,培养液中NaHCO3的加入量为3.95g/L。细胞培养瓶盖不应拧得太紧,以保证气体交换。 HEPES 是一种非离子缓冲液,在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力,但是非常昂贵,在高浓度时对一些细胞可能有毒.HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠(0.34g/L)共用,以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。在这种培养条件下,细胞培养瓶的盖子应拧紧,以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中。大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂,酸性培养液呈橙黄色,碱性培养液呈深红色。
5)在细胞培养中,尽管血清是维生素重要来源,但是许多培养基中添加了各种维生素以适合更多的细胞系生长。
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文献和实验性状分为固体、半固体和液体三种。 实验目的: 了解常用的液体、固体、半固体培养基的成分、制备方法和用途。 实验材料: 牛肉、蛋白胨、氯化钠、琼脂 、0.1mol/lNaOH溶液、酚红指示剂、蒸馏水等。 实验方法: 一、肉汤培养基 1、 将鲜牛肉除去筋膜和脂肪,切成小块后用绞肉机绞碎,以每500g碎牛肉加1000ml蒸馏水的比例混合后,置4℃冰箱过夜。 2、 次日取出浸泡物倒入容器内煮沸半小时,使肉渣凝固
酸反应物切勿与培养基表面接触,以溶化的石蜡凡士林液(即vaspar)密封皿底与玻璃板或皿盖的接触处。置30℃温箱培养。 2.疱肉培养基法 (1)取已除去筋膜、脂肪的牛肉500g,切成小方块,置1000ml蒸馏水中,以小火煮1小时,用纱布过滤,挤干肉汁,将肉汁保留备用。再将肉渣用绞肉机绞碎,或用刀切碎,最好使其成细粒。 (2)将保留的肉汁加蒸馏水,使总体积为2000ml,加入20g蛋白陈,2g葡萄糖,5gNaCl和绞碎的肉渣。置烧瓶中摇均匀,加热
培养基 专供培养厌氧菌用的无氧环境的培养基称厌氧培养基。一般采用两种方法:医学|教育网搜集整理①将培养基中加入还原剂以降低培养基的氧化还原电势,并用石蜡或凡士林封口,隔绝空气。常用的有疱肉培养基,是在肉浸液中加入煮过的肉渣,肉渣中含有不饱和脂肪酸和谷胱甘肽等还原物质,在氧化还原反应中造成厌氧环境。②将细菌接种在固体琼脂培养基上,然后放在无氧环境中培养,如厌氧袋、厌氧箱、厌氧罐等培养法。
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