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10852 500 GM
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文献和实验Isolation of Microtubules (Bovine Brain)
minutes at 4° C for further clarification. Collect 10 ml of the supernatant and determine the protein content of your sample using the Bradford protein assay (Appendix G ). Use bovine serum albumin or lysozyme for establishing a standard
dishes (e.g., Corning® CellSTACK®). 6. CO 2 incubator and biosafety cabinet. 7. Filter bottle, 0.5–1 L, 0.2-μm pore size (Corning or equivalent). 2.2. Preparation of Wnt3A CM for Fractionation 1. 20% (v/v) Triton X-100. 2. 1 M Tris-HCl, pH
). 3. Tris-buffered saline (TBS) with Tween (TBS-T): Prepare10× stock with 1.37 M NaCl, 27 mM KCl, 250 mM Tris-HCl, pH 7.4, and 1% (v/v) Tween-20. 4. Blocking buffer: 4% (w/v) bovine serum albumin (BSA) and0.1% (w/v) sodium azide in TBS. 5. Primary
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