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文献和实验g/mL 无 DNA 酶的 RNA 酶,37 ℃ 温育 1 h,以除去残留的 RNA。6. 重复步骤 4、5。1 g 细胞大约能提取到 2 mg DNA。(二)从植物组织中提取基因组 DNA【实验试剂与器材】1. CTAB 抽提液:2% (w/v) CTAB (十六烷基三甲基溴化铵),100 mM Tris.Cl,pH8.0, 20 mM EDTA,pH8.0,1.4M NaCl2. CTAB/NaCl 溶液:10% CTAB,0.7M NaCl配制方法:在 80 mL 双蒸水中溶解 4.1 g
1);(5)NaCl 溶液(1 mol/L);(6)RNaseA;(7)TE液;(8)体积分数大于99.5%和等于76%乙醇. 1.3 实验方法 首先采用标准的水稻DNA抽提方法(CTAB法),但效果不理想.后通过查阅相关资料,我们采用改良的CTAB法,具体方法如下: (1)每份材料取叶7 g,加液氮后,用乳钵磨碎,于-20℃冰箱中冷冻10~15 h. (2)分别加入β-巯基乙醇210 μL,搅拌均匀. (3)加入1.5%的CTAB液20 mL,搅匀,在56℃条件下水浴20 min. (4)转入50
1. 将菌株接种于液体 LB 培养基,37℃ 震荡培养过夜。 2. 取 1.5 ml 培养物 12000rpm 离心 2 min。 3. 沉淀物加入 567 ul 的 TE 缓冲液,反复吹打使之重新悬浮,加入 30ul 10%SDS 和 15ul 的蛋白酶 K,混匀,于 37℃ 温育 1 h. 4. 加入 100ul 5mol/L NaCl, 充分混匀,再加入 80ul CTAB/NaCl 溶液,混匀后再 65℃ 温育 10 min。 5. 加入
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