过碘酸-雪夫(AB-PAS)染色试剂盒

甲胎蛋白化学发光免疫定量分析方法的建立

  【摘要】  目的： 建立检测甲胎蛋白化学发光免疫定量分析方法. 方法： 采用双抗体异位点一步夹心法，以甲胎蛋白单克隆抗体作为固相包被，采用改良过碘酸钠法进行甲胎蛋白多克隆抗体与碱性磷酸酶偶联制备酶标抗体；以金刚烷胺衍生物CSPD作为底物，优化CSPD与SapphireII发光体系；用国家标准品校定定量标准品，建立了人血清AFP的化学发光免疫定量分析法. 用该法检测800份正常人血清，确定正常值参考范围，将临床血清标本100份与bayer Acs: 180�全自动发光体系统进行

ELISA中的试剂－结合物

较高的IgG，以免在与酶联结时其他杂蛋白的干扰。最好用亲和层析纯的抗体，这样全部酶结合物均具有特异的免疫活性，可以在高稀释度进行反应，实验结果本底浅淡。如用F(ab')2进行标记，则更可避免标本中RF的干扰。在ELISA中用酶标抗原的模式不多，总的要求是抗原必须是高纯度的。 3.2.3 　结合物的制备 酶标记抗体的制备方法主要有两种，即戊二醛交联法和过碘酸盐氧化法。 （1）戊二醛交联法：戊二醛是一种双功能团试剂，它可以使酶与蛋白质的氨基通过它而联结。碱性磷酸一般用此法进行标记。交联方法

单克隆抗体的标记

目前动物用单抗，在动物疫病诊断和检疫、妊娠检测、性别鉴定等方面有广泛的应用，大多以诊断试剂（盒）的形式提供，其中核心试剂为标记的单抗。下面将介绍最常用的几种标记技术。一、酶标记1、辣根过氧化物酶（HRP）标记辣根过氧化物酶（HRP）标记单抗和多克隆抗体的常用方法是过碘酸钠法。其原理是HRP的糖基用过碘酸钠氧化成醛基，加入抗体IgG后该醛基与IgG氨基结合，形成Schiff氏碱。为了防止HRP中糖的醛基与其自身蛋白氨基发生偶合，在用过碘酸钠氧化前先用二硝基氟苯阻断氨基。氧化反应末了，用硼氢