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低温
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现货
- 供应商:
上海善然生物科技有限公司
- 规格:
100ug
。我公司销售Peprotech 全面产品,现货供应!
PeproTech细胞因子中不含载体蛋白(Carrier Protein)或其他添加剂(如BSA、HAS或蔗糖等),并且通常以最少量的盐来进行冻干处理,因此微量的细胞因子在冻干过程中会沉积于管内,形成很薄或不可见的蛋白层。所以我们建议在收到产品后,务必在开盖前先离心,使粘在管盖或管壁上的蛋白聚集于管底(此时能否见到白色沉淀均属正常现象)。
1.离心:高速离心 (10, 000 rpm) 20-30 秒,或低速离心 (2, 000 rpm) 5 分钟。
2.溶解(Reconstitution):用去离子水或其它缓冲液(根据说明书要求进行选择)溶解至说明书要求的浓度 (一般为 0.1-1.0 mg/mL,如10ug的产品,需用10uL-100uL的去离子水或缓冲液溶解)。溶解时不可振荡,避免因化学键的断裂造成蛋白失活,可加入适当的溶剂轻摇并静置一段时间,待细胞因子完全溶解后使用。溶剂的选择:
1)要求用去离子水溶解的产品,务必不可用盐溶液,避免过高的盐浓度造成蛋白不可逆的析出;
2) 要求用盐溶液溶解的产品,请依照说明书上的浓度,同样也是为了避免过高的盐浓度。
3.分装和贮存(Aliquot and Storage):蛋白溶解后可根据自己的实验需要进一步稀释成工作液,稀释可用RPMI 1640、DMEM或PBS等溶液,其中最好含有5-10%的FCS (小牛或胎牛血清)或0.5 %的BSA(牛血清白蛋白)来稳定蛋白。工作液在4℃可保存1周,如需长期保存,则需分装冻存于-20℃ (注意:不可冻存于-80℃)。分装时每管中工作液的体积最好是一次实验的用量,以实现每次实验用完一只工作液,避免反复冻融引起蛋白活性的降低。
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遗传重组 genetic recombination 指分别来自两个亲本的基因连锁群间所产生的交换,形成两个亲本所没有的连锁群组合,产生具有重组性状的后代(重组体)的现象。因为真核生物是具有二套或二套以上的同源染色体的倍数体,所以一般在减数分裂形成生殖细胞时同源染色体之间会发生交叉从而出现重组;现在已知霉菌等在体细胞中也会发生重组。因为原核生物(病毒和细菌)是以单一的核酸为基因组的单倍体,因此如果进行杂交,两个亲本 DNA分子之间就会直接发生交换而形成重组体。不管哪一种情况
枪法(Biolistic-bombardment)(植物细胞) Transfer of T-DNA from Agrobacterium into a plant cell Regeneration of leaf disks infected by Agrobacterium DNA重组 外源基因插入与否可通过载体上的Lac Z基因进行初步的筛选。有外源基因插入的细菌呈白斑,无外源基因插入的细菌呈蓝斑
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