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联硕生物
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联硕生物是一家专业经营生物、仪器、试剂、耗材的公司,在广大客户的支持及公司全体员工不懈的努力下,公司的服务和业务网络已遍及全国,成为了国内生命科学领域产品的主要供应商之一。自成立以来,联硕生物一直秉承客户至上、服务至诚;诚信为本的理念,致力于做靠谱放心的专业服务商,助力您的科研成就!
主营品牌:Sigma、Amresco、santa、hyclone、PeproTech、ABcam、life、Axygen、Corning、AMEKO、Merck、promega、GE、nunc等
主营产品:
试剂盒:ELISA试剂盒、免疫组化试剂盒、分子生物学试剂盒、细胞凋亡试剂盒
细胞培养:血清,专业培养基,常用传统培养基
耗材:进口、国产细胞培养耗材、普通实验耗材
生化试剂:原装进口生化试剂、进口分装生化试剂、国产生化试剂
抗体:进口原装抗体、进口分装抗体、单克隆抗体、多克隆抗体、一抗、二抗等
联硕生物(上海-浙江)
公司官网:www.biolianshuo.com
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文献和实验水稍微浸湿,并用20×SSC使其饱和。将膜放在经20×SSC预饱和过的滤纸(Whatman 3MM)上。4.以5μl的DNA分装样品在滤膜上点样,待前一个样品干燥后再点第二个样品。5.将滤膜放在一张干燥的滤纸(Whatman 3MM)上稍微晾干,以5×SSC漂洗5min。6.将DNA固定于膜上,硝酸纤维素膜需置80℃真空烤炉2h。当尼龙膜仍潮湿时,应用Saran包装膜(或任何类似的塑料薄膜)包裹,将DNA面朝下置紫外透射仪上,紫外线(280mn)照射3~5min,这时的滤膜已可用于杂交。
膜或尼龙膜并剪去一角作为标记,水浸湿后,浸入转移液中 5 min。剪一张比膜稍宽的长条 Whatman 3 mm 滤纸作为盐桥,再按凝胶的尺寸剪 3~5 张滤纸和大量的纸巾备用。按下图所示进行转移。(转移过程一般需要 8-24 hr,每隔数 hr 换掉已经湿掉的纸巾。转移液用 20× SSC。注意在膜与胶之间不能有气泡。整个操作过程中要防止膜上沾染其他污物。)4. 转移结束后取出 NC 膜,浸入 6× SSC 溶液数 min,洗去膜上沾染的凝胶颗粒,置于两张滤纸之间,80 °C 烘 2 hr
凝胶干燥时遇到的主要问题是凝胶的变形和破裂。将凝胶放在Whatman 3MM滤纸上可防止干燥凝胶变形,但凝胶是否破裂取决于凝胶的厚度和干燥器的质量,因此,应尽量使用薄胶并使凝胶干燥器处于良好状态,使其真空压力波动极少。 (1)试剂与配制:固定液:冰醋酸:甲醇:水(10:20:70) (2)电泳后的凝胶用5~10倍体积固定液在室温下固定,酸性固定液扩散后可使凝胶中的溴酚蓝变黄。蓝色全部消失后,继续固定5min。为防止凝胶破裂,在进行步骤(2)之前可将凝胶浸泡于含20%甲醇、30%甘油的溶液
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