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MTS细胞增殖实验
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上海麒盟生物科技有限公司
实验原理
CellTiter 96® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay(a)是一种用比色法来检测细胞增殖和细胞 毒实验中的活细胞数量的检测试剂。此试剂含有一个新型的四唑化合物[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium, inner salt; MTS(a)] 和一种电子偶联剂(phenazine ethosulfate; PES)。PES具有增强的化学稳定性,这使它可与MTS混合形成稳 定的溶液。这种方便的“单溶液”模式,是在第一代CellTiter 96®AQueous Assay的基础上的改进,CellTiter 96®AQueous Assay中使用的电子偶联剂PMS与MTS溶液是分开提供的。
MTS (Owen’s reagent) 被细胞生物还原成为一种有色的甲臜产物,可直接溶解于培养基中(图1)。 这种转化很可能是在代谢活跃的细胞中的脱氢酶产生的NADPH或NADH的作用下完成的。检测时,只需将少量的CellTiter 96® AQueous One Solution Reagent 直接加入培养板孔的培养基中,孵育1–4小时,然后以酶标仪读取490nm的吸光度值。
MTS四唑盐和其甲臜产物的结构
实验流程将试剂平衡至室温,每100ul培养基中加入20ul CellTiter 96® AQueous One Solution Reagent,37℃孵育1-4小时,酶标仪490nm读取吸光值。
实验结果
CellTiter 96® AQueous One Solution Assay检测490nm处细胞数对吸光值的影响
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