
实时荧光定量PCR
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- 实时定量PCR(quantitative real time polymerase chain reacion,QRT-PCR),是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,测量每个循环的产物浓度,最后通过标准曲线对位置末班进行定量分析的方法。
- 2025年07月16日
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实时荧光定量PCR
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上海中亚生物基因研究所
其大致原理为每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数存在对数关系,利用已知起始拷贝数的标准品做出横坐标为起始拷贝数,纵坐标为Ct值的标准曲线(参照)。因此,通过测量未知样品的Ct值,便可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。
CSEA团队定量采用著名的SYBR Green和每个Applied Biosystem公司的TaqmanR技术。两台高精度qRT-PCR仪可以迅速完成您的定量要求。
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文献和实验实时荧光定量PCR从1996年美国AppliedBiosystems公司推出实时荧光定量PCR技术以来,该技术已经越来越广泛的应用到各类RNA的研究中,成为研究RNA必不可少的实验手段之一。目前比较常用的方法有两种:(1)TaqMan荧光探针法:该方法在特异性探针的两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当探针完整时,荧光基团发光被淬灭基团吸收;在PCR扩增过程中,探针被降解,荧光基团与淬灭基团分离,发出可被检测到的荧光,以此来监测整个PCR过程。(2)SYBR荧光染料法:该方法
miRNA实时荧光定量PCR 实时荧光定量PCR从1996年美国Applied Biosystems公司推出实时荧光定量PCR技术以来,该技术已经越来越广泛的应用到各类RNA的研究中,成为研究RNA必不可少的实验手段之一。目前比较常用的方法有两种:(1)TaqMan荧光探针法:该方法在特异性探针的两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当探针完整时,荧光基团发光被淬灭基团吸收;在PCR扩增过程中,探针被降解,荧光基团与淬灭基团分离,发出可被检测到的荧光,以此来监测整个
实时定量PCR也被称为实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR, qPCR),是一种在DNA扩增反应中加入荧光基团,以荧光信号积累实时监测每次PCR循环后产物总量,进而对待测样品中的目的序列进行定量分析的方法。 基本原理 在学习实时定量PCR数据处理之前,我们首先需要了解一下它的数学原理,Ct值为什么是我们数据处理过程中的一个关键的因素。这两个图显示的是实时定量PCR的一组结果。上图是原始的线性图谱,下图则是处理过的指数图谱,但是它们两者表示的是同样





