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癌胚抗原放免试剂盒操作说明书

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  • YB-302
  • 2025年07月10日
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    • 供应商：

      钰博生物

    • 检测范围：

      见说明书

    • 检测方法：

      酶联免疫

    • 应用：

      科研

    • 标记物：

      见说明书

    • 样本：

      血清/组织/尿液

    癌胚抗原放免试剂盒操作说明书
    CEA（HY-014） RIA KIT
    临床意义：
    人体消化系统的癌胚抗原（CEA），分子量约为150,000-200,000的糖蛋白。CEA是一种结肠癌的相关抗原。测定血液中CEA水平可用作癌症病人的监测，确定治疗效果好坏。肿瘤术后或者药疗之后，血液中CEA水平将下降。手术成功，CEA将持续下降直至正常水平。如手术失败,或癌症复发，CEA血清水平将再次回升到不正常水平。药盒利用均相竟争抑制原理,采用非平衡法对病人血清、血浆、胸水、腹水以及其它体液进行直接测定。
    药盒组成：
    1、 标准6瓶，浓度为0、5、10、20、40、80ng/ml。
    2、 125I-CEA 1瓶。
    3、 CEA抗体1瓶。
    4、分离剂（第二抗体）一瓶。
    癌胚抗原放免试剂盒操作说明书样品处理：
    取晨空腹静脉血，分离血清。2-8℃放置可保存一周，若冰冻保存，可放置四周。溶血
    和脂血样品不能使用,混浊样品离心取上清,高浓度血清样品(CEA>80ng/ml),应先用生理盐
    水稀释,计算结果时,要注意样品稀释倍数。胸、腹水、尿液可直接测定。
    操作方法：
    试管编号，按下表程序操作。
    操作表 （ 单位: ul）
    管 别
    标准品
    样品
    抗血清
    蒸馏水
    混匀，37℃温育2小时。
    125I-CEA
    混匀，4℃过夜，任取三管测总T（CPM）
    分离剂
    NSB管
    100（S0）
    --
    --
    100
    100
    1000
    S0管
    100
    --
    100
    --
    100
    1000
    S1-S末管
    100
    --
    100
    --
    100
    1000
    样品管
    --
    100
    100
    --
    100
    1000
    血清NSB管*
    100*
    --
    --
    100
    100
    1000
    *－－用新鲜人血清。
    混匀，室温放置15分钟，离心（3500转/分）15分钟，吸弃上清液，测定各管沉淀的放射性计数（CPM）。
    数据处理：
    1、 计算机处理：建议函数模型采用三次多项式或log～logit法。
    2、 计算、绘图法：
    计算各管的百分率：以S0（cpm数）为B0，各标准管Si（cpm数）为Bi，求各管的百分结合率。
    Bi Bi管（cpm）—NSB管（cpm）
    — %= —————————————— ×100
    B0 B0管（cpm）—NSB管（cpm）
    （1）线性回归：用logX～logitY回归，求出r、a、b值，样品含量可由下式计算得出。
    - a + logit Y
    Log X= ————
    b
    （2）绘图法：用各标准点计算的结果，在log～logit坐标纸上绘制标准曲线图，未知样品浓度可根据Bi/B0的百分结合率从标准曲线图上查出。
    正常叁考值：
    各实验室应建立自己的正常值。下面正常值仅供参考。
    CEA＜15ng/mL（15цg/L），阳性值＞20ng/mL（20цg/L）。
    癌胚抗原放免试剂盒操作说明书技术特性：
    1、曲线范围：（5～80）ng/ml（5～80цg/L）。
    2、灵敏度： < 2ng/ml（2цg/L）。
    3、特异性：CEA抗血清与AFP交叉反应合格。
    4、精密度：（X＝30.2ng/mL）批内CVw<4%，批间CVb<6% .
    保存及有效期：
    药盒于（2～8）℃避光保存，切勿冻存。自检定合格之日起有效期为45天。
    药盒参考数据：
    指标
    B/T（%）
    Bi/B0(%)
    项目
    NSB
    S0
    S1
    S末
    参数
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    • 实验操作篇

      ，不能得到足够的菌量来抽提质粒，摇菌时间一般 12-14 小时为宜。 ③质粒属于低拷贝类型，导致收集的细菌量过少。 ④提取时菌量过多：容易导致裂解不充分，且容易超过硅胶膜柱的承载上限，最终使得质粒提取效率降低，建议参考提取试剂盒建议的菌液量来提取。 ⑤质粒提取实验操作不当：比如在加入缓冲液重悬菌体时，菌体没有充分分散悬浮，导致后续裂解不充分。为指示菌体是否充分裂解，可以考虑在重悬缓冲液中加入指示剂（QIAGEN 质粒提取试剂盒中均有配备 LyseBlue 指示剂），均匀蓝色指示悬浮充分。 ⑥试剂使用

    • CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 293FT 细胞转染验证 and trouble shooting

      %；2. 72 h 后收集细胞提取基因组 DNA（按照基因组 DNA 提取试剂盒的说明书操作）；3. 使用事先设计好的引物进行 PCR 扩增，这里使用的酶是 NEB 公司的 Q5 high-fidelity Polymerase，一切按照该酶的说明书严格操作；4. 将目的条带切割下来并使用胶回收试剂盒回收 DNA 条带，一切按照胶回收试剂盒说明书进行操作；5. 回收后的 DNA 样本，经 T7 Endonuclease I 酶解验证错配 DNA，部分结果如下：T7 EI验证成功，开始正式实验时间飞逝，上次说

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