结合珠蛋白放免试剂盒说明书

结合珠蛋白放免试剂盒说明书
HPT（HY-10153） RIA KIT
结合珠蛋白 （haptoglobin，HPT）又称触珠蛋白，是一种分子量为85000的酸性糖蛋白，广泛存在于人类和多种哺乳动物 的血清及其他体液中。结合珠蛋白的主要功能是与 游离血红蛋白结合成稳定的复合物，然后被单核—巨噬细胞系统处理掉。正常情况下，人的红细胞在循环血中尽管不断受到机械损伤，但仍可保持其完整性，这与红细胞具有良好可塑性的细胞形态和血液微环境的相对稳定有关。当某种原因诱发红细胞在血管内破坏时，大量血红蛋白会释放到血液循环中，血红蛋白可以从人的肾脏滤过，造成肾脏损害，甚至造成不可逆转的肾功能损伤。当结合珠蛋白与游离血红蛋白结合成稳定的复合物后，由于其分子较大，不能从肾脏排出，这样可以阻止血红蛋白从肾小球滤过，避免游离血红蛋白对肾小管的损害。结合珠蛋白与游离血红蛋白结合成复合物后，呈现出新的抗原决定簇，可被单核细胞、巨噬细胞表面的血红蛋白清除受体（CD163）所识别并结合，之后被吞噬降解，以而除去了血循环中游离的血红蛋白。这种生理现象，为临床检验学提供确定临床是否发生了血管内溶血性疾病。结合珠蛋白又是一种急性期时相反应蛋白。当机体处在应激状态时，血液中的结合珠蛋白明显增多，如心肌梗塞、肿瘤、炎症、创伤、感染等病理状态时，以及应用某些激素，如皮质激素和雄性激素后，其血清含量常有显著升高，并与严重程度和预后有关。
标本的收集：空腹抽静脉血2ml离心取血清，-20℃保存三个月。
该药盒主要应用范围：
* 糖尿病的研究；
* 心血管病的研究；
结合珠蛋白放免试剂盒说明书药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1、HPT缓冲液1瓶
2、HPT（第二抗体）1瓶，用前充分摇匀。
3、HPT标准品5瓶，浓度为0.5、1、2、4、8 mg/L
4、HPT抗体 1瓶。
5、¹²⁵I –HPT 1瓶
测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
HPT RIA加液程序 （单位： ul ）
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
¹²⁵I- HPT 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500

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混匀，室温放置15分钟后，3500 转/分 4℃离心20 min，弃上清液，测沉淀cpm数。
结合珠蛋白放免试剂盒说明书结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。
注意事项：
本月标准品每瓶用 0.5 ml 缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 10.5 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 10.5 ml缓冲液溶解
本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
本试剂盒主要技术指标：
1、NSB：<5%。
2、灵敏度：<0.05 mg/L
3、标准曲线范围：0.5-8mg/L
4、批内变异系数：CVw<7.3%；
5、 批间变异系数：CVw < 10% 。
正常参考值：0.3-0.9mg/L各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。

本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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