粘膜地址素细胞粘附因子放免试剂盒说明书

粘膜地址素细胞粘附因子放免试剂盒说明书
MAdCAM-1（HY-10268） RIA KIT
黏膜地址素粘附因子（mucosal addressin cell adhesion molecule-1，MAdCAM-1）简称粘膜地址素-1，为60kDa的单链跨膜糖蛋白。属于免疫球蛋白超家族中的粘附分子，主要表达于肠道粘膜及其相关淋巴组织的血管内皮细胞表面。MAdCAM-1通过与淋巴细胞上相应配体特异性结合，而介导特定淋巴细胞亚群向肠道粘膜的定向迁移，故其在肠道粘膜免疫中具有重要作用。动物实验证实，结肠炎、胰岛素依赖性糖尿病、肝炎、生殖道炎，以及脑脊髓炎等慢性炎症性疾病与MAdCAM-1的异常表达有关。抗MAdCAM-1分子的mAb已用于上述慢性疾病的动物模型的治疗，并取得初步成果。
测定原理：本药盒应用放射免疫分析方法测定。根据竞争机制原理，125I- MAdCAM-1与抗体的结合量与标准或样品中的MAdCAM-1的含量呈一定函数关系。用免疫分离剂（PR）将结合部分(B)与游离部分（F）分离后，测定结合部分的放射性强度，通过数据处理可求出样品中MAdCAM-1的浓度值。
药盒应用：
炎症、肿瘤等病理学研究
粘膜地址素细胞粘附因子放免试剂盒说明书药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1、 缓冲液（PBS）1瓶。
2、 PR分离剂（第二抗体）
3、 MAdCAM-1抗体1瓶：用前充分摇匀
4、125I- MAdCAM-1标记 1瓶：
5、MAdCAM-1标准品6瓶，浓度为50、100、200、400、800、1600pg/ml
测定方法：

本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
MAdCAM-1 RIA加液程序 （单位： ul ）
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试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品
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缓 冲 液 —— 100 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
¹²⁵I- MAdCAM-1 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温15分钟， 3500 转/分 4℃离心20分钟，吸弃上清液，测定沉淀cpm数。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值， 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。
粘膜地址素细胞粘附因子放免试剂盒说明书注意事项：
本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本月分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
本试剂盒主要技术指标：
1． NSB：10%
2． 灵敏度：<5pg/ml
3． 标准曲线范围：0~1600pg/ml
4． 批内变异系数：CVw<9.3 %。
5． 批间变异系数：CVw < 10.4% 。
6． 正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
197±32.31pg/ml(n=25)。
本次药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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