可溶性CD14放免药盒操作说明书

可溶性CD14放免药盒操作说明书
sCD14（HY-10232） RIA KIT
可溶性sCD14(sCD14)是一种糖蛋白，根据其存在状态分为可溶性(sCD14)和膜结合型(mCD14)。sCD14受体分子量为55kDa，其编码基因位于第五号染色体5q23～5q31区，由两个外显子和一个88bp的短内含子组成。sCD14游离于血清中，mCD14主要表达于成熟的单核巨噬细胞，通过糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚固于细胞膜上。sCD14作为脂多糖(LPS)的受体，介导LPS的生物学功能，活化的单核/巨噬细胞等sCD14 + 细胞可释放前炎症反应细胞因子、化学因子、生长因子等导致炎症反应，活化的内皮细胞等sCD14 + 细胞可释放白细胞介素(IL)、生长因子、一氧化氮(NO)并表达粘附分子，参与炎症反应导致组织器官损伤。sCD14可非特异性中和、清除LPS从而减轻前炎症反应，sCD14也是革兰阳性菌细胞壁成分肽聚糖、分枝杆菌上的脂阿拉伯甘露糖及多种病原体的受体，它可促进单核细胞与活化的上皮细胞粘附；能与活化的淋巴细胞表面的sCD14配体相互作用，抑制T细胞增殖和B细胞产生抗体。
药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1、 缓冲液（PBS）1瓶。用时每瓶加蒸馏水至50ml..
2、 PR分离剂（第二抗体）
3、 sCD14抗体1瓶：用前充分摇匀
4、¹²⁵I- sCD14 1瓶：
5、sCD14标准品5瓶，浓度为0.5、1、2、4、8ug/ml
可溶性CD14放免药盒操作说明书测定方法：（非平衡法加样）
sCD14 RIA加液程序 （单位： ul ）
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 100 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
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摇匀4℃ 放24小时
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¹²⁵I- sCD14 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温15分钟， 3500 转/分 4℃离心20分钟，吸弃上清液，测定沉淀cpm数。

结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值， 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。
可溶性CD14放免药盒操作说明书注意事项：
本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本月分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
本试剂盒主要技术指标：
1． NSB：5%
2． 灵敏度：<0.05ug/ml。
3． 标准曲线范围：0.5~8ug/ml。
4． 批内变异系数：CVw<7.0 %。
5． 批间变异系数：CVw < 12.0% 。
6． 正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
1.5±0.53ug/ml(n=25)。
本次药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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