基质金属蛋白酶2放免药盒说明书

基质金属蛋白酶2放免药盒说明书
MMP-2（HY-10219）RIA KIT

基质金属蛋白酶是一个大家族，因其需要Ca++、Zn++等金属离子作为辅助因子而得名，其家族成员具有相似的结构，目前MMPs家族已分离鉴别出26个成员，编号分别为MMP1～26。根据作用底物以及片断同源性，将MMPs分为6类，为胶原酶、明胶酶、基质降解素、基质溶解素、furin活化的MMP和其他分泌型MMP。MMP-2是Ⅳ型胶原酶的一种非糖化形式，分子量为72kD，另一种被糖化形式，分子量为92kD，命名为MMP-9。MMP-2基因位于人类染色体16q21，由13个外显子和12个内含子所组成，结构基因总长度为27kb，。MMP－2 和MMP－9是基质金属蛋白酶家族的重要成员，均是明胶酶，可产生于正常组织细胞，以酶原形式分泌，当组织愈合、炎症及肿瘤发生发展时可激活形成IV 型、V 型胶原和明胶，在细胞外基质的降解和再塑造中发挥作用，并可造成肿瘤细胞沿着缺失的基底膜向周围组织浸润，引起肿瘤的侵袭和转移。
药盒主要应用范围：
*肿瘤疾病的研究
试剂盒组成：
1、MMP-2 缓冲液1瓶
2、MMP-2（第二抗体）1瓶，用前充分摇匀。
3、MMP-2标准品6瓶，浓度为50、100、200、400、800、1600ng/ml
4、MMP-2抗体 1瓶。
5、125I –MMP-2 1瓶
基质金属蛋白酶2放免药盒说明书实验步骤：
MMP-2操作步骤 单位（ul）
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试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品
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蒸 溜 水 —— 100 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
¹²⁵I- MMP-2 100 100 100 100 100
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混匀，4℃ 15-24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温放置30分钟后，3500 转/分 离心20分钟，去上清，测定沉淀cpm值。
结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。

注意事项：
本月标准品每瓶用 ml 缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液溶解
本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
本试剂盒主要技术指标：
1、NSB：<7.6 %。
2、灵敏度：<5ng/ml
3、标准曲线范围：0-1600ng/ml
4、批内变异系数：CVw<7.4%；
5、批间变异系数：CVw <6.2% 。
基质金属蛋白酶2放免药盒说明书正常参考值： 各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
151.14ng/ml±35.76ng/ml

本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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