解偶联蛋白3放免药盒操作说明书

解偶联蛋白3放免药盒操作说明书

UCP-3（HY-10209） RIA KIT
目前已发现5 种不同的UCPs 家族成员,分别为UCP1、UCP2、UCP3、UCP4、和UCP5/ BMCP1。UCPs 的共同特征是其单体由大约300 个氨基酸组成,每个单体均具有6 个穿膜结构域,UCPs 只有二聚体才有转运功能,UCPs 家族每个成员均有3 个由100 个氨基酸组成的重复序列。在上述几种解偶联蛋白中,由于UCP3 主要分布在骨骼肌中,与运动关系密切。通过对人类骨骼肌cDNA 文库筛选,Boss 等发现了两条RNA 转录产物,由于其与UCP1 的高度同源性,从而命名为UCP3 (在同一年的早些时候已经发现了UCP2) ,UCP3 根据其氨基酸的长度不同,分为长链UCP3 (UCP3L) 和短链UCP3 (UCP3S) 。Solanes 等确定了其在染色体上的位置及基本结构,UCP3 由7 个外显子构成,长度为8. 5 kb 左右,位于11 号染色体的长臂(11q13) ,与UCP2 相邻。

药盒组成：（常温运输，4℃保存）
71． UCP-3缓冲液1瓶
72． UCP-3（第二抗体）1瓶，用前充分摇匀。
73． UCP-3标准品7瓶，浓度为0.25、0.5、1、2、5pg/mL
74． UCP-3抗体 1瓶。
75． 125I –UCP-3 1瓶

解偶联蛋白3放免药盒操作说明书测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
UCP-3 RIA加液程序 （单位： ul ）
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- UCP-3 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500

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混匀，室温放置15分钟后，3500 转/分 4℃离心20 min，弃上清液，测沉淀cpm数。

结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。
注意事项：
本月标准品每瓶用 0.5 ml 缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 10 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 10.5ml ml缓冲液溶解
本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
解偶联蛋白3放免药盒操作说明书 本试剂盒主要技术指标：
72、 NSB：<5%。
73、 灵敏度：<100pg/ml。
74、 标准曲线范围：0-4000ng/L
75、 批内变异系数：CVw<7.4%；
批间变异系数：CVw < 10% 。
76、 正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
1.26±0.47 pg/mL
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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