α-促黑素细胞刺激素药盒操作说明书

α-促黑素细胞刺激素药盒操作说明书

α-MSH （HY-10218）RIA KIT

促黑素细胞刺激素（α-Melanocyte Stimalating Hormoneα-MSH）是一种内源性的神经调节肽，人类垂体细胞及许多垂体外细胞都可产生。通过与其受体结合发挥作用。在生理状态下，αMSH在体内的浓度非常低，变化范围小。当机体产生炎症时，αMSH在血桨中浓度增高，αMSH具有强有力的抗炎免疫调节能力，抑制前炎症细胞因子的生成及活性，使巨噬细胞合成一氧化氮减少，抑制中性粒细胞的趋化性，调整前列腺素的合成，促进抗生细胞因子IL-10的合成。

药盒组成：

1、 ¹²⁵I-αMSH（冻干品） 1 瓶。

2、 αMSH抗体（冻干品） 1 瓶

3、标准品β-EP（冻干品）6瓶，浓度分别为0、0.5、1、2、4、8ng/ml。

4、分离剂(第二抗体)一瓶。

5、缓冲液1瓶。

α-促黑素细胞刺激素药盒操作说明书实验步骤：

１、取组织（米粒大小），立即称重后加到1ml 100℃生理盐水中煮沸5分钟后迅速冷却，再加0.5ml 1N醋酸制成匀浆，置4℃ 1-2小时后离心2000 G 15分钟，取上清，冷冻干燥后用RIA缓冲液复溶，进行RIA测定。或煮沸迅速冷却后用0.1N盐酸制成匀浆，置4℃1-2小时后再用0.1N NaOH中和，离心取上清液-20℃保存待测。

２、测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：

α-MSH RIA 加样程序 单位：ul

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试 剂 T NSB S₀ S₁—S₅ 标 本

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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——

MSH 标 准 —— —— —— 100 ——

标 本 —— —— —— —— 200

抗 体 —— —— —— —— 100

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4℃ 放置24小时

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¹²⁵I-α-MSH 100 100 100 100 100

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4℃ 放置24小时

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分 离 剂 500 500 500 500 500

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振荡3分钟，3000转/分 离心 15分钟，弃上清，测沉淀计数cpm。

结果计算：

以N/T、B/T计算NBS、S₀结合百分率，以B/B₀计算标准及待测样品结合百分率，

在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值。或由自动γ计数器预先编制程序，直

接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。

α-促黑素细胞刺激素药盒操作说明书注意事项：

本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释

本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释

本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释

本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）

正常参考值：0.6～1.2ng/ml

本药盒技术参数：

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T NSB S₀ S₁ S₂ S₃ S₄ S₅ S₆ S₇ s₈

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CPM

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N/T% B₀/T% B/ B₀ %

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