脑钠肽前体N放免药盒操作说明书

脑钠肽前体N放免药盒操作说明书
NT-ProBNP（HY-183） RIA KIT
脑钠肽前体N末端片段(NT-proBNP)是利钠肽(NP)家族的一员,无生物学活性,是心功能障碍性疾病诊断、疗效监测和预后评估等最佳的心肌标记物,其在围心脏手术期的变化能反映患者心脏功能的改变。NT-proBNP是proBNP的裂解物，因此NT-proBNP的产生和BNP的分泌密切相关。人类BNP基因片段位于1号染色体短臂的远程，与其上游的ANP基因片段相连，BNP的信使核糖核酸(mRNA)由900～1000个核昔酸组成，不同种属间稍有差异。它可表达由134个氨基酸组成的BNP前体原，前体原脱去26个氨基酸的N端信号肽成为含108个氨基酸的BNP前体(proBNP)，在其分泌过程中或进人血液后裂解为BNP 32(77～108，含32个氨基酸的C端片段)及N-末端脑钠肽前体(1～76，NT-proBNP)。　
已有研究表明，心房结构改变尤其心房纤维化,是房颤发生和持续的重要病理基础。已有体外实验研究表明除了心肌细胞外,心肌组织的成纤维细胞同样亦可以分泌NT-proBNP。目前研究认为NT- proBNP是一个抗纤维化因子, NT- proBNP能直接抑制心肌成纤维细胞的胶原合成,在房颤患者中其可能通过影响心房组织成纤维细胞分泌而在心房间质纤维化中起调控作用。
药盒组成：
1、¹²⁵I- NT-proBNP标记一瓶 。
2、NT-proBNP抗体一瓶。
3、缓冲液一瓶。
4、分离剂（第二抗体）一瓶。
5、NT-proBNP标准品5瓶：用缓冲液稀释成50、150、450、1350、4000pg/ml
脑钠肽前体N放免药盒操作说明书标本采集：
取静脉血2ml注入含10%EDTA.Na2 30ul和抑肽酶20ul的试管中，混匀4℃，3000rpm/ min离心10min，分离血浆（溶血样品影响测定结果）。如需要可分装2-3份保存，放-20℃可保存2个月。在-70℃可保存半年。测定前，使样本置于室温或冷水中复融，再次4℃，3000rpm/ min离心5min，取上清测定
操作方法：
NT-proBNP RIA KIT操作程序（单位：ul）
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试 剂 T NSB S0 S1~ S5 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
标 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
¹²⁵I- NT-proBNP 100 100 100 100 100
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充分混匀，室温 温育48小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温15分钟，3500 转/分 离心15分钟，去上清，测定沉淀cpm-值。
脑钠肽前体N放免药盒操作说明书结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测物结合百分率，在半对数座标纸上绘制标准曲线，并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
注意事项：
1．本月每瓶标准品用 ml缓冲液稀释；
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本月PR试剂在使用前充分混匀（不可冰冻）。
2．测定兔标本时，应改用20%PEG 500ul/管 分离；同时，NSB、S0~S5管补加正常人血清100ul/管（或r-球蛋白100 ul/管），U0 、U管补加PBS 100ul/管。
本试剂盒主要技术参数：
NSB：<0.5%。
标准曲线范围： 50~4000 pg/ml。
灵敏度：<5pg/ml。
精密度：批内CV4.7%,批间CV8.5% 。
特异性：本抗体与生长抑素，β-内啡肽及P-物质等多肽均无交叉反应。
正常参考值：54.75±-24.26pg/ml。
附注：
1、 本药盒有效期为一个月。
2、 标准品在使用前配制。
3、 用户如遇特殊情况，收到试剂盒后不能在有效期内使用，除标记品外，请您将标准品、抗血清冷冻保存，缓冲液、分离剂4℃保存，待下次只购一瓶标记即可。
4、 10%EDTA二钠室温保存，若出现沉淀，加热即可溶解
本次药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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