IFN-α干扰素放免药盒操作说明书

IFN-α干扰素放免药盒操作说明书
IFN-α（HY-10273） RIA KIT
干扰素(Interferon，IFN)，是由英国科学家Isaacs于1957年的发现的，它是一种细胞因子，具有抑制细胞分裂、调节免疫、抗病毒、抗肿瘤等多种作用。其本质是蛋白质，类型可分为α、β、γ、ω等几种。IFN-α是主要的抗病毒物质，主要由浆细胞样树突状细胞合成分泌,白细胞等在细菌、DNA或RNA病毒、多聚肌昔酸多聚胞昔酸、多核昔酸等刺激物诱导下产生，具有抗病毒和免疫调节功能。

标本的收集：空腹抽静脉血2ml离心取血清，-20℃保存三个月。
反应原理：采用竞争机制原理，标准品或样本中的IFN-A和加入的125I –IFN-A(标记的IFN-A抗原）共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 125I –IFN-A(标记的IFN-A抗原）与抗体的结合量与标准或样品中的IFN-A的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂将结合部分和游离部分分离后，测定结合部分的结合率作图，即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中IFN-A的含量。
该药盒主要应用范围：
 乙型肝炎
 肺炎
 病毒性疾病
IFN-α干扰素放免药盒操作说明书药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1． IFN-A 缓冲液1瓶
2． IFN-A（第二抗体）1瓶，用前充分摇匀。
3． IFN-A标准品6瓶，浓度为50、100、200、400、800、1600pg/ml
4． IFN-A抗体 1瓶。
5． 125I –IFN-A 1瓶
测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
IFN-A RIA加液程序 （单位： ul ）
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试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
¹²⁵I-IFN-A 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温放置15分钟后，3500 转/分 4℃离心20 min，弃上清液，测沉淀cpm数。
IFN-α干扰素放免药盒操作说明书结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。
注意事项：
本月标准品每瓶用 ml 缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液溶解
本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
本试剂盒主要技术指标：
1、 NSB：<7%。
2、 灵敏度：<5pg/ml
3、 标准曲线范围：50-1600pg/ml
4、 批内变异系数：CVw<7.9%；
批间变异系数：CVw <9.7% 。
5、 正常参考值：120±32pg/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。

本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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