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U87MG+luc 人脑星形胶
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U87MG/luc
100万
镜像绮点
胶质母细胞瘤
细胞系
脑组织
组织
否
上皮细胞样
冻存/复苏
长期
贴壁培养
T25
细胞介绍
该细胞系由PontenJ等建立,源于恶性神经胶质瘤。裸鼠皮下接种可成瘤。该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。
细胞特性
1) 来源:神经胶质瘤
2) 形态:上皮样,贴壁细胞
3) 含量:>1x106 细胞数
4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途:仅供科研使用。
细胞筛选:
该细胞为已经构建好稳定转染Luc的细胞,随细胞传代次数的增加,其Luc荧光强度会逐渐减弱。若实验要求需要维持荧光强度,可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。 建议收到细胞后至少传3代,冻存留种后再进行筛选。初次进行细胞筛选时,建议加入终浓度为1ug/ml嘌呤霉素的完全培养基维持培养,若无细胞漂浮或者漂浮较少,即可更换为含2ug/ml嘌呤霉素的完全培养基继续筛选,以此类推,至最高药物浓度为5ug/ml。若筛选过程中,漂浮细胞大于60%,则停止筛选,换成正常培养基培养,至细胞密度约80%,可继续加入同浓度嘌呤霉素进行筛选。当加入5ug/ml嘌呤霉素时细胞正常增殖,可停止筛选,用不含药完全培养基正常培养。
一.培养基及培养冻存条件准备
1) 准备MEM(推荐iCell-0012)培养基;优质胎牛血清,10%;2mM L-谷氨酰胺 ( iCell-0900 ) ;NEAA 1% (iCell-01000) ;双抗,1%。
注意事项:培养细胞的过程中细胞会发生堆叠和松散贴壁的细胞团这是正常的。需要2-3天对细胞进行一次换液以保证细胞的正常生长。该细胞贴壁较慢,复苏细胞后48h 内尽量不要移动细胞让细胞达到最佳的贴壁状态。生长过程中会悬浮细胞出现,在换液和传代过程中需要离心回收悬浮的细胞。丢弃悬浮的细胞会使细胞的密度变低,这个细胞在培养过程中不会达到100%的融合。细胞生长过密会引起贴壁的细胞变成悬浮的状态。明胶或多聚赖氨酸包被的培养瓶可以使细胞更好的贴壁。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
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567 人阅读发布时间:2018-08-23 14:35
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