神经激肽A放免试剂盒说明书

神经激肽A放免试剂盒说明书

NKA(HY-176) RIA KIT

神经激肽A(NeuroKinin,NK)是速激肽家簇的一种，是含有10个氨基酸的肽类物质，

是NANCe感觉神经肽的递质，广泛分布于中枢和周围神经系统，具有强烈迅速收缩气管平滑机的作用，又称为速激肽哮喘患者吸入NKA后，能引起剂量依赖性支气管收缩。Heaney等发现，NKA是哮喘患者支气管肺泡灌洗液（BALF）中主要的速激肽，其浓度很高，且在抗原激发后显著增高。研究结果表明，小儿哮喘发作时血浆NKA显著增加，明显高于缓解组及对照组，哮喘不同发作状态时的NKA水平也有显著差异，重度哮喘发作时的NKA水平明显高于轻、中度哮喘发作者，哮喘发作时NANC神经调节失衡，NANCe兴奋性亢进，释放NKA明显增多，而NANCi兴奋性相对减弱，其递质释放减少，因而气道阻力增加，气道痉挛加重，说明NKA参与了哮喘发病的病理生理过程，可能在哮喘发作中起重要作用，神经激肽A在免疫方面的作用引起研究者的关注，认为其具有促进细胞因子和炎症介质释放的作用，能增加血管上皮细胞黏附分子的表达并刺激人T、B淋巴细胞、单核细胞等细胞的分泌。研究发现，NKA在哮喘的发生、发展中可能起重要作用，对其进一步研究有重要临床意义。

药盒组成：

1、¹²⁵I-NKA标记一瓶 。

2、NKA抗体一瓶。

3、缓冲液一瓶。

4、分离剂（第二抗体）一瓶。

5、NKA标准品6瓶：用缓冲液稀释成6.4、3.2、1.6、0.8、0.4、0.2ug/L

神经激肽A放免试剂盒说明书标本采集：

取静脉血2ml注入含10%EDTA.Na2 30ul和抑肽酶20ul的试管中，混匀4℃，3000rpm/ min离心10min，分离血浆（溶血样品影响测定结果）。如需要可分装2-3份保存，放-20℃可保存2个月。在-70℃可保存半年。测定前，使样本置于室温或冷水中复融，再次4℃，3000rpm/ min离心5min，取上清测定

操作方法：

NKA RIA KIT操作程序（单位：ul）

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试 剂 T NSB S₀ S₁~ S₆ 样 品

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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——

标 准 品 —— —— —— 100 ——

标 品 —— —— —— —— 100

抗 体 —— —— 100 100 100

⁵I-NKA 100 100 100 100 100

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充分混匀，室温 温育48小时

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分 离 剂 —— 500 500 500 500

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混匀，室温15分钟，3500 转/分 离心15分钟，去上清，测定沉淀cpm-值。

结果计算：

以N/T、B/T计算NSB、S₀结合百分率，以B/B₀计算标准及待测物结合百分率，

在半对数座标纸上绘制标准曲线，查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。

神经激肽A放免试剂盒说明书注意事项：

1、本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释；

本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释；

本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释；

2、收到测定盒后，请放2-8℃冰箱中保存。

3分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）,标记、抗体、溶解后，直接应用，冰冻保存。标准

品溶解后，0.1ml分装，-20℃可放一月，避免反复冻融。

本试剂盒主要技术参数：

灵敏度：0.02 ug/ L

精密度：批内：CV<5%；批间CV为<10% 。

正常参考值：0.5-1.5 ug/ L

本月药盒参考数据：

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T NSB S₀ S₁ S₂ S₃ S₄ S₅

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CPM

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N/T% B₀/T% B/ B₀ %

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