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文献和实验1.原理 蛋白质中的酪氨酸与色氨酸和Folin酚试剂中的磷钨酸、磷钼酸作用后,在碱性条件下不稳定,被还原成蓝色的化合物(钼蓝)。因此通过比色即可测知标本中的蛋白含量。该法的优点是操作简单、灵敏度高,且不受溶液中脂多糖的干扰。 2.试剂 试剂甲: A液:Na2 CO3 10.00g NaOH 2.00g 酒石酸钾钠(或钾盐钠盐)0.25g 混合、溶于500ml蒸馏水中。 B液:CuSO4 .5H2O 0.5g H2O 100.00ml 用前将A液50份与B液1份混合即为试剂甲
每ml含0.1mg、0.2mg、0.3mg、0.4mg……0.9mg,以盐水对照。 ⑶ 测各管OD280 值。 ⑷ 以OD280 值为纵坐标,蛋白含量为横坐标,绘制标准曲线。 3.样品测定 将待测样品以盐水适当稀释,在0.10mg/ml~1.00mg/ml之间,以生理盐水为对照,测OD280 值,从标准曲线上查出蛋白含量。 (三) Folin 酚法 1.原理 蛋白质中的酪氨酸与色氨酸和Folin酚试剂中的磷钨酸、磷钼酸作用
免疫球蛋白提取 (Immunoglobulin isolation):蛋白定量技术
) Folin 酚法 1 .原理 蛋白质中的酪氨酸与色氨酸和 Folin 酚试剂中的磷钨酸、磷钼酸作用后,在碱性条件下不稳定,被还原成蓝色的化合物(钼蓝)。因此通过比色即可测知标本中的蛋白含量。该法的优点是操作简单、灵敏度高,且不受溶液中脂多糖的干扰。 2 .试剂 试剂甲: A 液: Na2 CO3 10.00g NaOH 2.00g 酒石酸钾钠(或钾盐钠盐) 0.25g 混合、溶于
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