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文献和实验High-Throughput Tetramethylbenzidine (TMB) Screen for Peroxidases
Peroxidases catalyze the decomposition of hydrogen peroxide coupled to the oxidation of a variety of organic and inorganic substrates. Produced by a broad variety of natural sources, most peroxidases use heme or vanadium as a cofactor
过氧化物酶 TMB 法 TMB法：原理同DAB法，但反应产物呈深蓝色沉淀。 1)孵育液配制 A液：亚硝基铁氰化钠(硝普钠) 100mg H2 0 92．5ml 0．2mol/L醋酸缓冲液(pH 3．3) 5ml B液：TMB 5mg 无水乙醇 2～4ml 临用前将A液和B液混合即为预
体，洗板 5 次，方法同步骤 3。 底物：每孔加底物溶液(TMB) 90 μL，混匀，加上覆膜，37℃ 避光孵育 15 分钟左右。提示：根据实际显色情况酌情缩短或延长孵育时间，但不可超过 30 分钟。当标准孔出现明显梯度时，即可终止。 终止：每孔加终止液 50 μL，终止反应。提示：终止液的加入顺序应尽量与底物溶液的加入顺序相同。 读值：立即用酶标仪在 450 nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提前打开酶标仪预热，设置好检测程序。 实验完毕后，将未用完的试剂按规定
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