Merck Millipore Anti-CD25抗体(小鼠

单克隆抗体综述

TNF-α抗体，用于治疗风湿性关节炎和节段性回肠炎。4、SimulectNovartis公司的抗CD25抗体，用于抗移植排斥。5、Erbitux美国Imclone公司的抗EGFR（Her-1）单克隆抗体，目前FDA已批准其用于治疗结直肠癌。6、人源化抗体利用现有的无数已详细分析过的小鼠抗体，取其与抗原直接接触的那段抗体片段（互补决定区，CDR）与人的抗体框架嫁接，经亲和力重塑，可维持其特异性和大部分的亲和力，同时几乎去除免疫原性和毒副作用。7、成功的例子（1）HerceptinGenentech公司的抗

（共享）单克隆抗体技术

单克隆抗体技术 抗原提纯与动物免疫 对抗原的要求是纯度越高越好，尤其是初次免疫所用的抗原。如为细胞抗原，可取1×107个细胞作腹腔免疫。可溶性抗原需加完全福氏佐剂并经充分乳化，如为聚丙烯酰胺电泳纯化的抗原，可将抗原所在的电泳条带切下，研磨后直接用以动物免疫。 　　选择与所用骨髓瘤细胞同源的BALB/c健康小鼠，鼠龄在8～12周，雌雄不限。为避免小鼠反应而不佳或免疫过程中死亡，可同时免疫3～4只小鼠。 　　免疫过程和方法与多克隆抗血清制备基本相同，因动物、抗原形式、免疫

小鼠药物干预后两种蛋白的磷酸化酪氨酸水平检测

的用量每次为0.5-1毫升。洗涤时离心条件和吸除上清的要求同上面的步骤C3。 5）.完成最后一次洗涤后，去除上清，加入20-40微升1XSDS-PAGE电泳上样缓冲液Vortex重悬沉淀，瞬时高速离心把样品离心至管底。 6）.100℃或沸水浴处理3-5分钟，取部分或全部样品可测定浓度或者用于SDS-PAGE电泳，暂时不用的样品可以-20℃保存。Western blot检测实验试剂：Phosphotyrosine抗体( Millipore, #05-321, 1:500)；Goat Anti