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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 宿主:
NA
- 适应物种:
Human
- 克隆性:
单克隆
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文献和实验相关专题单克隆抗体 单克隆抗体问世以来,在临床诊断、治疗与预防等方面发挥了巨大的作用。但是常用的鼠源单克隆抗 体具有较强的免疫原性,在临床反复应用中会引起人抗鼠抗体(human anti -mouse antibody,HAMA)反应, 导致半衰期缩短,治疗效果减弱。鼠源抗体人源化是指利用DNA 重组技术和蛋白质工程技术,对抗体基 因进行重组,在保留鼠源抗体对抗原有效结合部位的同时,最大限度地降低非结合部位的鼠源性。这种通 过重组基因所表达
单克隆抗体技术 抗原提纯与动物免疫 对抗原的要求是纯度越高越好,尤其是初次免疫所用的抗原。如为细胞抗原,可取1×107个细胞作腹腔免疫。可溶性抗原需加完全福氏佐剂并经充分乳化,如为聚丙烯酰胺电泳纯化的抗原,可将抗原所在的电泳条带切下,研磨后直接用以动物免疫。 选择与所用骨髓瘤细胞同源的BALB/c健康小鼠,鼠龄在8~12周,雌雄不限。为避免小鼠反应而不佳或免疫过程中死亡,可同时免疫3~4只小鼠。 免疫过程和方法与多克隆抗血清制备基本相同,因动物、抗原形式、免疫
法,测定抗原 的双抗体夹心法和测定抗原的竞争法等。本实验采用间接法测定单克隆抗体效价。其主要过程为:首先将已知定量抗原吸附在聚苯乙烯微量反应板的凹孔内,加待测抗体,保温后洗涤以除去未结合的杂蛋白质,加酶标抗抗体,保温后洗涤,加底物保温30分钟后,加酸或碱终止酶促反应,用目测或光电比色测定抗体含量。 三、仪器、原料和试剂 仪器 聚苯乙烯96孔酶标板、微量移液管、酶联免疫 阅读仪、水浴锅。 原料 单克隆 抗体 试剂
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