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- GMS20035.2
- 美国
- 2025年10月28日
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- 供应商：
杰美基因
- 库存：
大量
- 规格：
20次
供应试剂主要类别：细胞技术、分子技术、蛋白化学、免疫抗体、医学技术、生物化学、模式生物、微生物、植物、载体、毒理、营养、平台等等相关技术的各种大量试剂。
其中蛋白化学技术相关试剂类别如下：
蛋白制备试剂专题
蛋白定量试剂专题
蛋白处理试剂专题
核酸－蛋白结合凝胶电泳定量分析（McKay）试剂专题
核酸－蛋白结合凝胶迁移电泳分析（EMSA）试剂专题
核酸－蛋白结合足迹法（FOOTPRINTING）分析试剂专题
核酸－蛋白结合免疫沉淀分析（CHIP）试剂专题
蛋白－蛋白结合分析试剂专题
融合蛋白处理试剂专题
蛋白/抗体标记试剂专题
蛋白电泳试剂专题
蛋白电泳染色试剂专题
蛋白杂交试剂专题
糖蛋白试剂专题
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文献和实验【转帖】一种快速，灵敏的，经济的测序方法--焦磷酸测序 介绍
首先通过PCR制备待测序的DNA模板，PCR的引物之一是用生物素标记的。PCR产物和偶连avidin的Sepharose微珠孵育，DNA双链经碱变性分开；纯化得到含生物素标记引物的待测序单链，并和测序引物结合成杂交体。 Pyrosequencing技术是由四种酶催化的同一反应体系中的酶级连反应，四种酶是：DNA聚合酶（DNA polymerase）、硫酸化酶(ATP sulfurylase)、荧光素酶(luciferase)和双磷酸酶(apyrase).反应底物为adenosine 5′
酶活性，此酶将缺口5’侧核苷酸依次切除。其结果是在缺口平移（nick tr－anslation）。根据这个原理，如果用高强度的放射性核苷酸（通常为α-32PdATP）置换先前存在的核苷酸，则可制备比活性高达108cpm（每分钟计数）/μg的32P标记DNA。用缺口平移法标记的DNA探针能满足大多数杂交要求。 2．DNA快速末端标记 大肠杆菌DNA聚合酶i 经枯草杆菌蛋白酶切割可得到两条多肽链，其中分子量为76kd的大片段称为Klenow片段。该酶具有完整聚合酶I的5’→3’聚合酶活性和3’→
较短的简并性较高的成套寡核苷酸探针；③较长而简并性较低的成套寡核苷酸探针。多用32P标记寡核苷酸探针，如：1）通过T4噬菌体多核苷酸激酶催化的磷酸化反应标记合成的寡核苷酸探针，在合成寡核苷酸时期5’端缺少一个磷酸基，因而易用T4噬菌体多核苷酸激酶进行磷酸化反应，而将α-32P从[γ-32P]ATP转移至其5’端。这种磷酸化反应最多能使每一寡核苷酸分子中掺入一个32P原子。2）用大肠杆菌DNA聚合酶i Klenow片段标记合成的寡核苷酸探针，其比活性更高，每一寡核苷酸分子可带有若干个放射性原子，放射
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