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DM Biology
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369850
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笃玛
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96T/48T
α1-微球蛋白 (α1-MG)
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此活动截止日期为2016年6月15日,此活动解释权为上海笃玛生物科技有限公司所有。
联系电话:021-60520536 15821347267(乐经理) QQ:1787309105
下面说下ELISA实验常遇到的问题以及解决方案。
α1-微球蛋白 (α1-MG)
异常
结果描述
【白板】
显色步骤结束后,酶标板所有孔均无颜色。阳性对照不显色。
原因分析
1.试剂已过效期,或不同试剂盒组分混用
2.错加、漏加试剂底物、显色剂 A或B
3.洗板及加样过程中,酶标受污染失活失去催化显色剂显色的能力
4.终止液误作洗涤液稀释或当底物缓冲液配置
5.蒸馏水有问题
对策
1.检查试剂的组分及批号,确认未过期以及所有组分均属对应的试剂盒。不同试剂盒或不同批号的试剂不能混用
2.严格按说明书的步骤操作,加完试剂后可观察一下液面高度是否一致,以减少漏加现象
3.确认盛酶标的容器不含酶抑制剂如叠氮钠等,确认配制洗液的容器已洗干净
4.每次配制时都应看清标签标明物质
5.确认配制洗液的纯化水达到要求且未污染,与好蒸馏水比较
显色弱、灵敏度 低
实验结束后,包括阳性对照、质控在内的所有板孔颜色均较淡。
1.试剂盒超过期, 超过有效期的产品可能会产生很弱的信号; 试剂盒没有按规定进行保存,受高温影响
2.试剂、样品用前未平衡至室温
3.加入试剂的体积和时间有误, 移 液器计量不准,吸嘴内水分太多或不清洁
4.洗板及加样过程中,酶标受污染失活而失去催化显色剂显色的能力
5.孵育时间及孵育温度未达到要求 ,反应板放入培养箱时注意温度并及时调整
6.洗板次数过多,或浓缩洗液稀释倍数不符合要求;洗涤冲击力太大。浸泡时间太长
7.显色剂加量不足或顺序颠倒,或混合后加入
8.底物作用时间不够
9.蒸馏水水质有问题
α1-微球蛋白 (α1-MG)
对策:
1.实验前检查试剂的组分及批号,确认试剂未过期。 不要将试剂盒长时间置于常温下,按使用规定储藏。
2.从低温冰箱中取出的试剂及样品应置室温平衡 20分钟左右。
3.确定所使用的试剂体积正确,加入时间适当。 校正移液器,移液器与吸嘴配合要紧密吻合。移液不宜太快,排放应完全
4.确认盛酶标的容器不含酶抑制剂如叠氮钠等,确认配制洗液的容器已洗干净,确认配制洗液的纯化水达到要求且未受污染
5.孵育温度应控制在 37-38℃,孵育时间严格按照说明书操作。 保温期内不宜多开门,以免影响保温
6.严格按说明书要求稀释浓缩洗液及洗板,减小洗涤冲击力,按说明书要求置留洗涤液时间和洗涤次数
7.显色剂滴瓶垂直向下,持力均匀,滴速不宜过快,先加显色剂?A,后加显色剂B,不可将A、B液混合后加入
8.准确定时
9.测定蒸馏水配制试剂对酶免疫法的影响
α1-微球蛋白 (α1-MG)
| DMZ060 | 羊抗AFP血清 | 1∶5.0×103 | 冻干品 | 1.0ml | |
| DMZ061 | 兔抗AFP血清 | 1∶2.0×104 | 冻干品 | 1.0ml | |
| DMZ062 | 马抗CEA血清 | 1∶1.0×104 | 冻干品 | 0.1ml | |
| 1.0ml | |||||
| DMZ063 | 兔抗CEA血清 | 1∶1.0×104 | 冻干品 | 0.1ml | |
| 1.0ml | |||||
| DMZ064 | 兔抗人肝Ferr.血清 | 1∶5.0×104 | 冻干品 | 0.1ml | |
| 1.0ml | |||||
| DMZ065 | 兔抗人PSA血清 | 1∶1.5×104 | 冻干品 | 0.1ml | |
| 1.0ml | |||||
| DMZ066 | 绵羊抗T3血清 | 1∶6.2×104 | 冻干品 | 0.1ml | 可测FT3 |
| 1.0ml | |||||
| DMZ067 | 兔抗T3血清 | 1∶3×104 | 冻干品 | 1.0ml | |
| DMZ068 | 绵羊抗T4血清 | 1∶4.0×103 | 冻干品 | 1.0ml | 可测FT4 |
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文献和实验Zymolyase Dissolve in 10% glucose. Store aliquots (25 µl) at 20o C in common freezer for stock solutions Use once and dispose Comments: alternative is to dissolve in SCE, 40% gycerol, 20 mg/ml final. Can use
Oxalyticase Dissolve in 0.1 M NaCl, 0.02% Na azide, 50% glcyerole Store aliquots (1 ml) at 20o C in common freezer for stock solutions 上一篇:ALPHA FACTOR ARREST AND RELEASE 下一篇:GLASS BEADS
摘 要一、人成骨肉瘤MG-63细胞株和成人成骨细胞的培养与分化特性的观察目的:观察人成骨肉瘤MG-63细胞株和正常成人成骨细胞分化的特性。方法:在细胞培养的不同时间,用α-磷酸奈酚法测定碱性磷酸酶(ALP)活性;放射免疫法测定骨钙素(BGP)含量;半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测I型胶原、MMP-1、TIMP-1基因mRNA表达;Van GieSon氏苦味酸酸性复红染色法染色细胞I型胶原。结果:人成骨肉瘤MG-63细胞株接种培养第7天后I型胶原基因表达较高。MMP-1表达量随时间
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