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α1-微球蛋白 (α1-MG)

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      DM Biology

    • 库存

      369850

    • 供应商

      笃玛

    • 规格

      96T/48T

    α1-微球蛋白 (α1-MG)

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    联系电话:021-60520536 15821347267(乐经理) QQ:1787309105

    下面说下ELISA实验常遇到的问题以及解决方案。

    α1-微球蛋白 (α1-MG)


    异常
    结果描述
    【白板】
    显色步骤结束后,酶标板所有孔均无颜色。阳性对照不显色。

    原因分析
    1.试剂已过效期,或不同试剂盒组分混用
    2.错加、漏加试剂底物、显色剂 A或B
    3.洗板及加样过程中,酶标受污染失活失去催化显色剂显色的能力
    4.终止液误作洗涤液稀释或当底物缓冲液配置
    5.蒸馏水有问题

    对策
    1.检查试剂的组分及批号,确认未过期以及所有组分均属对应的试剂盒。不同试剂盒或不同批号的试剂不能混用
    2.严格按说明书的步骤操作,加完试剂后可观察一下液面高度是否一致,以减少漏加现象
    3.确认盛酶标的容器不含酶抑制剂如叠氮钠等,确认配制洗液的容器已洗干净
    4.每次配制时都应看清标签标明物质
    5.确认配制洗液的纯化水达到要求且未污染,与好蒸馏水比较


    显色弱、灵敏度 低

    实验结束后,包括阳性对照、质控在内的所有板孔颜色均较淡。

    1.试剂盒超过期, 超过有效期的产品可能会产生很弱的信号; 试剂盒没有按规定进行保存,受高温影响
    2.试剂、样品用前未平衡至室温
    3.加入试剂的体积和时间有误, 移 液器计量不准,吸嘴内水分太多或不清洁
    4.洗板及加样过程中,酶标受污染失活而失去催化显色剂显色的能力
    5.孵育时间及孵育温度未达到要求 ,反应板放入培养箱时注意温度并及时调整
    6.洗板次数过多,或浓缩洗液稀释倍数不符合要求;洗涤冲击力太大。浸泡时间太长
    7.显色剂加量不足或顺序颠倒,或混合后加入
    8.底物作用时间不够
    9.蒸馏水水质有问题

    α1-微球蛋白 (α1-MG)


    对策:
    1.实验前检查试剂的组分及批号,确认试剂未过期。 不要将试剂盒长时间置于常温下,按使用规定储藏。
    2.从低温冰箱中取出的试剂及样品应置室温平衡 20分钟左右。
    3.确定所使用的试剂体积正确,加入时间适当。 校正移液器,移液器与吸嘴配合要紧密吻合。移液不宜太快,排放应完全
    4.确认盛酶标的容器不含酶抑制剂如叠氮钠等,确认配制洗液的容器已洗干净,确认配制洗液的纯化水达到要求且未受污染
    5.孵育温度应控制在 37-38℃,孵育时间严格按照说明书操作。 保温期内不宜多开门,以免影响保温
    6.严格按说明书要求稀释浓缩洗液及洗板,减小洗涤冲击力,按说明书要求置留洗涤液时间和洗涤次数
    7.显色剂滴瓶垂直向下,持力均匀,滴速不宜过快,先加显色剂?A,后加显色剂B,不可将A、B液混合后加入
    8.准确定时
    9.测定蒸馏水配制试剂对酶免疫法的影响

    α1-微球蛋白 (α1-MG)

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