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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
杰美基因
- 库存:
大量
- 规格:
10毫升
供应试剂主要类别:细胞技术、分子技术、蛋白化学、免疫抗体、医学技术、生物化学、模式生物、微生物、植物、载体、毒理、营养、平台等等相关技术的各种大量试剂。
其中分子技术相关试剂类别如下:
DNA萃取试剂专题
胶回收或PCR产物纯化试剂专题
基因组DNA纯化试剂专题
法医学基因组DNA萃取试剂专题
DNA连接试剂专题
PCR反应试剂专题
RNA纯化试剂专题
RT-PCR试剂专题
RNA分析试剂专题
微型RNA(miRNA)试剂专题
核酸电泳试剂专题
报告基因检测试剂专题
甲基化分析试剂专题
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文献和实验液(8 cm × 8 cm 的膜加 5 mL 即可),将膜的背面贴紧杂交瓶壁,正面朝向杂交液。放入 42 ℃ 杂交炉中,使杂交体系升到 42 ℃。取经超声粉碎的鲑鱼精 DNA(已溶解在水或 TE 中)100 ℃ 加热变性 5 min,迅速加到杂交瓶中,使其浓度达到 100 μg/mL。继续杂交 4 hr。鲑鱼精 DNA 的作用是封闭 NC 膜上没有 DNA 转移的位点,降低杂交背景、提高杂交特异性。2.杂交倒出预杂交的杂交液,换入等量新的已升温至 42 ℃ 的杂交液,同样加入变性的鲑鱼精 DNA。将探针
0.8; 4. 室温下3000g离心收集酵母菌体,50ml缓冲液A洗涤一次; 5. 重悬菌体于4ml缓冲液A中,按0.2ml/管分装于1.5ml的离心管中,每管加入11ulDMSO,混合后迅速于液氮中冷冻, 6. -70℃保存 毕氏酵母的转化 1. 将约50ug线性化质粒DNA溶于20ul TE或水中,直接加于冻结的酵母细胞中;加入担体DNA(40ug变性超声线性化鲑鱼精DNA)以获得最大转化率; 2. 37℃水浴孵育5min,中间混合样品1~2次;
珠子对照样品外每个样品中加入一抗,抗体的量按照以往经验来加,1-10ug的抗体/25ugDNA效果较好。3加入20ul的proteinA/G珠子(预先用超声处理成为单链的鲱精DNA和BSA吸附,详见步骤4.3a)到所有样品总,4°C摇转IP过夜。3a将蛋白A/G珠子与单链鲱精DNA进行预处理。如果同时使用蛋白A珠子和蛋白G珠子,等体积混合这两种珠子使用RIPA溶液洗3次。除去RIPA溶液,加入单链鲱精DNA到珠子终浓度为75ng/μl,再用BSA将珠子终浓度定到0.1μg/μl。加入两倍珠子
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