高质纯化聚丙烯酰胺凝胶粉碎法胶回收试剂盒

核酸电泳工作流程——5 大主要步骤

缓冲液前，凝胶须完全凝固。凝胶梳应平稳地向上提起，以免撕裂凝胶、扭曲胶孔。移除梳子和添加缓冲液后，注意清除孔里的气泡。对于聚丙烯酰胺凝胶，应用缓冲液彻底冲洗胶孔，以清除残留未聚合的丙烯酰胺。 水平凝胶应朝向凝胶盒 ，样品孔位于负极一侧，以便在电泳启动后，将样品移动至正电极侧（图 4A）。该方向可记为“跑向红色”，因为正电极通常为红色。垂直凝胶盒中，胶孔设计在顶部（图 4B）。 图 4. 水平和垂直电泳系统的凝胶装置。 箭头表示电泳中核酸迁移的方向。 4. 在凝胶中可视化样品 凝胶运行完成后，需对样品

胶DNA片段回收方法全攻略

. 无NaI干扰后续实验 . 大片段DNA保存较好，不会被剪切 使用心得： 这个试剂盒不同于Qiagen其它的胶回收试剂盒，利用的是配合高离液盐(chaotropic salt)的silica-gelparticles，因此QiaEX可以从盐，琼脂糖凝胶，聚丙烯酰胺凝胶，染料，蛋白以及核苷酸中无需苯酚抽提或者酒精沉淀即可获得纯化DNA片段。这个试剂盒使用方法和玻璃奶的试剂盒基本一样，区别在于玻璃奶是粉碎的玻璃，因此可能存在大小不一、边缘尖锐等情况，在离心

PCR产物的TA克隆 (DNA的胶回收和连接)

原理】 1.DNA片段回收方法：DNA片段在适当浓度的琼脂糖凝胶中，通上一定电压进行电泳，不同大小的DNA分子由于迁移率的不同而分离开。切下带有所需DNA片段的凝胶，用冻融法、玻璃奶回收法或商品化胶回收试剂盒将目的片段回收纯化。 2.利用Taq酶能够在PCR产物的3’末端加上一个非模板依赖的A，而T载体是一种带有3’T突出端的载体，在连接酶作用下，可以把PCR产物插入到质粒载体的多克隆位点，可用于PCR产物的克隆和测序。