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- 文献和实验
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大量
- 供应商:
杰美基因
- 规格:
20次
供应试剂主要类别:细胞技术、分子技术、蛋白化学、免疫抗体、医学技术、生物化学、模式生物、微生物、植物、载体、毒理、营养、平台等等相关技术的各种大量试剂。
其中分子技术相关试剂类别如下:
DNA萃取试剂专题
胶回收或PCR产物纯化试剂专题
基因组DNA纯化试剂专题
法医学基因组DNA萃取试剂专题
DNA连接试剂专题
PCR反应试剂专题
RNA纯化试剂专题
RT-PCR试剂专题
RNA分析试剂专题
微型RNA(miRNA)试剂专题
核酸电泳试剂专题
报告基因检测试剂专题
甲基化分析试剂专题
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文献和实验可分为荧光探针和荧光染料。荧光探针又包括Beacon技术(分子信标技术,以美国人Tagyi为代表)、 TaqMan探针(以美国ABI公司为代表)和FRET技术(以罗氏公司为代表)等;荧光染料包括饱和荧光染料和非饱和荧光染料,非饱和荧光染料的典型代表就是现在最常用的SYBR GreenⅠ;饱和荧光染料有EvaGreen、LC Green等。 嵌合荧光染料法(SYBR GreenⅠ)SYBR Green I是荧光定量PCR最常用的DNA结合染料,与双链DNA非特异性结合。在游离
分析.4、几个概念:(1)扩增曲线 :(2) 荧光阈值:(3)Ct值:CT值的重现性:5、定量原理:理想的PCR反应: X=X0*2n非理想的PCR反应: X=X0 (1+Ex)nn:扩增反应的循环次数X:第n次循环后的产物量X0:初始模板量Ex:扩增效率5、标准曲线6、绝对定量1)确定未知样品的 C(t)值2)通过标准曲线由未知样品的C(t)值推算出其初始量二、实时荧光定量PCR的几种方法介绍 方法一:SYBR Green法 (一)工作原理 1、SYBR Green 能结合到双链DNA的小沟
PCR过程。(2)SYBR荧光染料法:该方法利用了SYBR Green荧光染料非特异性与双链DNA结合并发光的特性,检测PCR的全部进程,从而判定初始RNA的量。 常用的miRNA第一链合成方法成熟的miRNA大小只有22nt左右,在用实时荧光定量PCR检测miRNA时,难点在于如何识别如此小的miRNA并合成第一链。目前常用的用于识别并合成miRNA第一链的方法主要有颈环法和加尾法两种。(1)颈环法原理图(2)加尾法原理图由于成熟miRNA较小,无法用常规的方法直接进行反转录、PCR
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