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低温
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2年
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北诺
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1000
- 供应商:
北诺
BL21 Plyss(DE3)
BL21Condon Plus (DE3)
TB1(DE3)
C41(DE3)
C43(DE4)
Rosetta(DE3)
Origami B (DE3)
Rosetta-gami-B(DE3)
Rosetta-gami(DE3)Plyss
DH5α
Top10
Top10F'
JM109(DE3)
TG1
Xl1-Blue
X10-Gold
HB101
DH10Bac
STBL3菌
BJ5183细菌
PGEX4T-1
PGEX4T-2
PGEX4T-3
PGEX-6P-1
PGEX-KG(不完整)
PET3b
PET5b
PET11a
PET15b
PET20b
PET21b
PET22b
PET24a
PET25b
PET26b
PET27b
PET28a
PET28b
PET30a
PET31a
PET32a
PET35
PET41a
PET43.1
PET50b
PET52b
PET302
PET303
PET-Dsba
PET-GST
PET-His
PET-Trx
PDsred2-ER
PET32a-DsRed2
PET41a-DsRed2
PGEX4T-1-DsRed2
pEGFP-N1
PLPP-STII
PLLP-OmpA
PTrc-CKS
Pmal-c2x
Pmal-p5x
PMBP-C
PMBP-P
PUC19
PET28a-sumo
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pproexhta
pproexhtB
PcoldI
PcoldI-sumo
PBV220
求交换各种人源基因
PEGFP-N1
PGL-4.15
PRL-TK
PRL-SV40
PCDNA3.1+/(-)
大肠菌株DH5α
大肠菌株JM109
大肠菌株DH10B
大肠菌株BL21(DE3)
pBV220
pET26b
pET30a
pET5b
Rosetta-gami-B(DE3)
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文献和实验CRISPR/Cas9 是一种强大的基因组编辑工具,今天我们介绍 CRISPR/Cas9 系统操作。以下操作说明是基于作者冰糖个人实验室操作,仅供参考。 质粒介绍我们使用的是 Feng Zhang 实验室的系统的 pX330 质粒,如下图所示: 酶切系统 37 ℃, 3 hr;Run 1% gel,回收。Elute 到 50 mL H2O。我们利用 BbsI 消化载体形成粘末端,以利于下游 oligo 退火产物的连接;酶切时请充分,且绝对不能加 CIP 处理
手把手教你利用 CRISPR-Cas9 系统精准敲除靶标基因
一、CRISPR-Cas 系统简介图 1 CRISPR-Cas9 系统介绍CRISPR-Cas9 系统是一种被广泛运用的基因组编辑工具,它来源于细菌的适应性免疫系统。CRISPR-Cas9 系统包括:Cas9 酶和一个向导 RNA。 向导 RNA 作用是引导 cas9 到基因组的特异性位点上切割。如图 1 所示。目前为止,CRISPR-Cas9 系统主要有两方面应用: 基因敲除和基因敲入。基因敲除时, 一旦 DNA 的双链断裂反应(DSB)被 Cas9 切割诱导发生, 细胞会启动 NHEJ
,也使得 CRIPSR 的机理逐渐清晰。越来越多的不同菌中的 CRISPR 系统被发现,随后研究者们根据他们降解外源的遗传物质的方法,将他们分为了三类。如图中的 Type I and Type III.这两套系统由于参与的蛋白众多,需要几个复合物共同作用才能发挥作用,使得它不宜操作和改造。但其他几个系统的发现的过程也是非常值得一讲的,都是非常漂亮的工作。(mark 先,待补充) 四、窗户纸就快捅破了-Cas9 很多同学知道 Cas9, 并不知道还有 Cas1,Cas2,Cas
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