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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
N-Lauroylsarcosine
- 规格:
50g
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文献和实验异硫氰酸胍—酚法提取RNA的原理如下:GIT与β-巯基乙醇共同作用抑制RNase的活性;GIT与 十二烷基肌氨酸钠 (Sarcosyl)作用使蛋白质变性,从而释放RNA;酸性条件下DNA极少发生解离,同蛋白质一起变性被离心下来,RNA则溶于上清中。该法所提RNA纯度高完整性好较适合纯化mRNA,逆转录及构建cDNA文库,因此为大多数人采用。与氯化铯方法比较,虽然纯度稍差一些,小分子RNA,如tRNA、snRNA不易去除,但产量高完整性好,盐易去除
实验试剂 1. Tris-Mg 缓冲液 10mM Tris-Cl 5mM MgCl2 pH 7.3,4℃保存 2. 2%(w/v)十二烷基肌氨酸钠 (SLS) 实验步骤 1. 于20ml 营养肉汤中过夜培养细菌,37℃,200rpm。 2. 10000g、20min、4℃离心,去上清。 3. 20ml预冷的Tris-Mg缓冲液重悬,同样
设计有误及降解的模板一样,都可能使反应不能产生产物。此外,以下几种物质都可以抑制PCR的进行;苯酚、氯仿、硫氰酸胍、十二烷基硫酸钠(SDS),N-十二烷基肌氨酸钠、腐殖酸、乙醇、溴酚蓝、EDTA及矿物油。
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