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生长抑素放免药盒操作说明书

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  • hz-10172
  • 2025年07月14日
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    生长抑素放免药盒操作说明书
    S.SHY-10172RIA KIT
    生长抑素(Somatostatin S.S)为脑肠肽,具有广泛的生理作用。本药盒用于血浆提取液,组织提取液和脑脊液中S.S含量的测定。请认真阅读说明书并严格实行。
    生长抑素放免药盒操作说明书药盒组成及配制:冻干品-20℃保存,一经溶解应避免反复冻融。液体试剂4℃保存。
    1、缓冲液1瓶。
    2、免疫分离剂(第二抗体)1瓶。
    3、标准品2瓶,浓度为2560pg/瓶,一瓶用做标准曲线,一瓶用做回收试验。
    4、125I - S.S 2瓶,用前每瓶加缓冲液 ml溶解。
    5、S.S抗体2瓶,用前每瓶加缓冲液 ml溶解
    6、去激素血浆1瓶。
    7、牛血清白蛋白(BSA):0.2g。
    8、EDTA-Na2,抑肽酶:自备。
    9、生理盐水(含0.2%BSA),自备。用于复溶血浆提取样本。
    生长抑素放免药盒操作说明书 血浆标本的收集:
    1、静脉血2ml ,置于4℃预冷的试管内,每个试管含水量10% EDTA-Na2 30ul
    及抑肽酶500KIU/ 40 ul。(我公司可提供抑肽酶160元/瓶)
    1、 低温离心,1500g×15分钟。
    2、 将血浆标本按0.5ml/管分装于玻璃试管中,-20℃贮存备测(可贮存3个月)。
    血浆样本的提取
    1、于0.5ml血浆中加入50ul冰醋酸,混匀,逐滴加入2ml 4℃预冷丙酮,边滴边摇,
    最后在旋转混匀器上混匀,提取管(瓶)不能用塑料管(瓶)!!!。。
    2、4℃ 离心1500g×15分钟。
    3、将上清液倒入16×100mm玻璃试管(或西林瓶)中。 沉渣中加入80%4℃预冷丙酮1ml
    (80ml 丙酮加20ml蒸馏水)。摇匀后,再次离心1500g×10分钟。
    4、合并两次上清液,加蒸馏水0.5ml,乙酸乙酯-合液(3:1 V/V)3ml,加塞,上下震摇约50次。静置或离心分层,吸去上层有机溶剂,保留水相(注意勿吸去水溶液,可保留少量乙酸乙酯液)。
    5、将水溶液管(瓶)置凉风下(空调或电扇)将有机溶剂吹掉后所余液体用冷冻抽干机抽干。若无冷冻抽干机亦可于40℃水浴中,用氮气或压缩空气吹干。干燥后可密封置4℃冰箱保存,备一周内测定(或-20℃保存2­—3个月)
    生长抑素放免药盒操作说明书 组织的提取:
    取适宜大小的组织快,立即称重后于煮沸的生理盐水(1-2ml)中煮沸3分钟,冷却后加1N冰醋酸0.5ml于匀浆器中制成匀浆,再用1N NaOH 0.5ml中和,离心3500转/分,20分钟(最好是低温离心)取上清液贮存于-20℃以下待测(样本可保存2—6个月)。
    回收试验
    1.取S.S标准一瓶,加缓冲液1 ml稀释,浓度度为2560,然后倍比稀释成浓度为1280、
    640、320pg/ml。
    2.回收管:取试管3支,分别加入浓度为640、1280、2560 pg/ml的S.S标准液0.1ml,
    于每管中加去激素人血浆0.5ml混合,按血浆标本提取法(1~6)与标本管同时进
    行提取。
    放免分析
    1、自冰箱取出吹干的标本管,回收管,加入生理盐水0.5ml/管(含0.2%BSA)重新溶解
    (组织提取直接进行)。
    2、 S.S 标准1瓶每瓶加1 ml缓冲液稀释成浓度为5120 pg/ml,然后倍比稀释成浓度为
    1280、640、320、160、80、40、20、10pg/ml,共8管。
    3、 操作步骤: (双管重复测定)
    S.S RIA 加液程序 (单位:ul )
    ————————————————————————————————
    试 剂 T NSB B0 S1~S8 回收管 样本管
    ————————————————————————————————
    标本提取液 —— —— —— —— —— 200
    回收管提取液 —— —— —— —— 200 ——
    缓 冲 液 —— 400 300 200 100 100
    标 准 品 —— —— —— 100 —— ——
    抗 体 —— —— 100 100 100 100
    ———————————————————————————————
    充分混匀,4℃ 放置24小时
    ———————————————————————————————
    125I- S.S 100 100 100 100 100 100
    ———————————————————————————————
    摇匀4℃ 温育48小时
    ———————————————————————————————
    分 离 剂 —— 600 600 600 600 600
    ———————————————————————————————
    混匀,室温放置15分钟后,3500转20转/分4~10℃离心,弃上清。测定沉淀cpm数。
    结果计算:
    以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,
    在半 对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
    回收率= 回收管含量实测值×2.5 ÷回收时加入的S.S含量 × 100%
    标本S.S浓度(pg/ml)=标准管测值÷2÷回收率。其中“2”为容积校正系数。
    标本S.S正常参考值:空腹10.1±7.2pg/ml(X±SD).正常人≤30pg∕ml
    本月药盒参考数据:
    —————————————————————————————————————————
    T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8
    —————————————————————————————————————————
    CPM
    —————————————————————————————————————————
    N/T% B0/T% B/ B0 %
    —————————————————————————————————————————中文名称:猴α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA kit 英文名称:ELISA Kit for Alpha-2-Heremans Schmid Glycoprotein (aHSG)
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