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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
● -20°C to -70°C for 12 months in lyophilized state; ● -70°C for 3 months under sterile conditions after reconstitution.For long term storage, the product should be stored at lyophilized state at -20°C or lower.
- 英文名:
Human Ephrin-A4 / EFNA4 Protein, Fc Tag
- 库存:
4///1
- 供应商:
ACROBiosystems
- 规格:
1mg/250ug
| 规格: | 1mg | 产品价格: | ¥8190 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 250ug | 产品价格: | ¥2520 |
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文献和实验纯化最常用的方法之一,是亲和层析法,借助标签和配体的亲和力进行蛋白纯化。纯化的重组蛋白通常能以特异性的方式被洗脱,例如,在 Strep 标签蛋白纯化中,加入生物素(biotin)即可断开 Strep 标签与配体 Strep - Tactin 的作用,达到有效洗脱的目的。得到高纯度有活性的蛋白质应用在多种下游实验中,如研究蛋白质间相互作用等。 那么是否可以以此为基础,将标签配体亲和力加以利用,结合免疫识别特性,用温和的方法得到高纯度的目的细胞呢? 一、「画龙点睛」的表位标签—— Fab
引入高价金属离子(具有氧化性);二、可以加入低剂量的还原剂来维持蛋白的还原环境,或者是氧化还原对。7. 采用 pET22b 分泌表达载体,但总在细胞质中表达,有分泌表达的建议吗?解答:有可能是折叠不完善,可以先尝试降温等降低表达的速度方式,让蛋白尽量完成折叠。如果该载体分泌效果不好,还可以考虑换信号肽,比如 pelB 换成 OmpA。8. 常用 Fc 标签融合表达时会遇到目的蛋白下方出现 Fc 蛋白,有办法避免吗?解答:首先需要确定 Fc 标签和目的蛋白之间有没有其他序列。如果两者之间没有其他序列
结合较少的SDS,因此阻碍了蛋白的泳动。富含脯氨酸的蛋白会在SDS-PAGE胶中移动得特别慢。但是如果蛋白的等电点在5-9之间,并且组成的氨基酸组分没有明显的偏好,那么目的蛋白迁移率与预期相差较远就很有可能不是由于凝胶电泳造成的。 这个时候最好利用C-端或者N-端的标签进行Western Blot,看是否由于蛋白被蛋白酶降解而导致多条目的条带或者比预期小很多的条带出现。如果蛋白酶过高可以尝试换个缺陷菌株。 Q2:如何得到可溶的蛋白? A2:如果希望得到能行使功能的蛋白,蛋白应该以可溶形式表达
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