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MEM培养基 (含Earle平衡盐)

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      RPMI 1640 medium

    MEM培养基 (含Earle平衡盐),原代细胞|细胞系|细胞株|菌种;细胞库管理规范,提供的细胞株背景清楚,提供参考文献和最优培养条件!
    MEM培养基 (含Earle平衡盐)培养条件:
    完全培养基:DMEM高糖培养基90%;胎牛血清10%。
    培养条件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
    MEM培养基 (含Earle平衡盐)制备:
    1. 分离和培养宿主细胞;
    2. 通过病毒介导或者其它的方式将多能性相关的基因导入宿主细胞;
    3. 将病毒感染后的细胞种植于饲养层细胞上,并在ES细胞专用培养体系中培养,同时在培养期间根据需要加入相应的小分子物质以促其重编程;
    4. 出现ES样克隆后进行IPS细胞的鉴定(细胞形态、特定基因的表达、表观遗传修饰、体外分化潜能等方面)。
    细胞生长:贴壁生长
    细胞形态:上皮样;多角形
    细胞传代:1:2-1:4传代;每周2-3次
    MEM培养基 (含Earle平衡盐)传代方法:
    收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
    一.如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
    二.如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
    1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
    2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来。
    3. 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中。1:3~1:6传代;2~3天1次
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    相关实验
    • alpha-MEM培养基成分及其与MEM培养基的比较

      相关专题   MEM培养基常常用于培养哺乳动物贴壁细胞的培养,增加或者减少MEM培养基中的某些成分即可用于其它类型的细胞培养 。alpha-MEM培养基中的成分也比MEM要多很多,常被用来培养比较难培养的细胞。 一、alpha-MEM 的成分列表如下: COMPONENTS Molecular Weight Concentration (mg/L) Molarity (mM) 1、Amino

    • MEM培养基的配制步骤

      相关专题   MEM 1L 配方 1配置前准备:配置培养基新制备的milli water。调节pH值的酸碱溶液也应该使用这种水配置。制备培养基的器皿清洗干净,并用milli water润洗两次。 2.溶解培养基:取5%终体积的milli water,加入到1L玻璃杯中,将干粉培养基倒入烧杯,水洗包装袋内面两次,倒入培养液中。磁力搅拌助溶。 3.补加试剂:根据包装袋说明加入NaHCO3(2.2

    • MEM培养基使用方法

      相关专题 MEM细胞培养基 MEM培养基 中文使用说明书 1、保存在2-8度干燥环境,避光。 2、称量出比最终容积小5%的蒸馏水,混合的容器尽可能接近最终容积。 3、将干粉加入到室温15到30度的水中,轻柔搅拌,勿用热水。 4、冲洗出包装袋内所有干粉。 5、每升培养基加入2.2g碳酸氢钠。 6、用水稀释至最终的容积,搅拌直至溶解。不要过分混合。

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