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北京盛科博源生物科技有限公司
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文献和实验TRICINE GELS Protocol (For Low MW proteins (
Stock Solutions1) Gel Buffer: 3 M TrisHCl pH8.45 + 0.3% SDS. Keep RT. (Prepare: 18.15gr Tris + 150mg SDS + H2O up to 50ml. Adjust pH before you add the SDS) 2) 40% Acrylamide solution 29:1 (Acrylamide 29 / Methylene bis Acrylamide 1) or 40
为横座标,绘制洗脱曲线。(7)合并、浓缩将洗锐峰的上坡段与下坡段各管收集液分别进行合并,以peg(mw6000)浓缩至所需体积,加入0.02% NaN3防腐,于4℃保存备用。长期保存时应贮于-40℃冰箱。(8)a-50凝胶的再生 在柱上先以2mol/l NaCl洗脱蛋白至流出液的OD 280nm二、注意事项1、柱的选择:从理论上说,只要柱足够长,就能获得理想的分辨率,但由于层析柱流速同压力梯度有关,柱长增加使流速减慢,峰变宽,分辨率降低。柱的直径增加,使流体流动的不均匀性增加,分辨率明显下降。2、纯化
液分别进行合并,以PEG(MW6000)洗缩至所需体积,加入0.02%NaN3防腐剂,于4℃保存备用。 8. A-50凝胶的再生:在柱上先以2M NaCl洗柱上的杂蛋白至流出液的OD280nm〈0.02,再以 蒸馏 水洗去柱中盐。然后按预处理过程将A-50再处理一遍即达再生。近期用时泡于洗脱 缓冲液 中4℃保存;近期不用时,以无水酒精洗2次,再置50℃温箱烘干,装瓶内保存。 (四) 注意事项 1. 柱的选择:从理论上说
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