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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Acid phosphatase assay kit
- 库存:
大量
- 供应商:
上海信誉
产品用途: 科研ELISA检测试剂盒.提供实验代测服务.
产品询价:你可以通过电话,邮件,传真或在线客户方式询价
检测种属:大小鼠,人,猪,豚鼠,兔子,牛,羊,鸡,鸭酸性磷酸酶(ACP)测定试剂盒(分光光度法)等种属
产品样本:体液,血清,血浆,细胞培养上清液,尿液,组织匀浆,心房水标本等。
贮藏条件:试剂盒保存2-8℃,有效期6个月
酸性磷酸酶(ACP)测定试剂盒(分光光度法)安全性:1,避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。4.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。5.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。6.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。7.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。8.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。9.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。10.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。11.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。12.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
酸性磷酸酶(ACP)测定试剂盒(分光光度法)说明
1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任酸性磷酸酶(ACP)测定试剂盒(分光光度法)何影响。
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文献和实验目的要求 1.熟悉酸性磷酸酶显示方法的原理及操作步骤 2.观察酸性磷酸酶在细胞中的分布 基本原理 酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)主要存在于巨噬细胞,定位于溶酶体内。在溶酶体膜稳定完整时,底物不易渗入,ACP活力微弱或无活性,经固定,在合适pH条件下,膜本身变为不稳定,逐渐改变其渗透性,底物可以渗入,酶活力被显示。 ACP在酸性条件
酸性磷酸酶金属盐―铅法 酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)广泛分布于机体各种组织细胞内,主要存在于细胞的溶酶体内.常作为溶酶体标志酶,此外,还存在于内质网和胞质内。在组织退行性变、核酸和蛋白质代谢活动增加时,酸性磷酸酶活性增强。酸性磷酸酶还参与酯类代谢。因此,它在疾病、免疫反应和细胞损伤与修复过程中具有一定生物学意义。 其基本原理是在酸性环境下,底物p―甘油磷酸钠被酸性磷酸酶水解,释放出磷酸,磷酸遇铅离子则生成磷酸铅沉淀,最后与硫化铵作用形成棕褐色硫化铅沉淀。其反应
1.96孔细胞培养板中培养细胞,去培养液。用0.01mol/L PBS洗涤1次(如为悬浮细胞则用离心洗涤)。 2.去洗涤液后加入磷酸酶底物100μl/孔。 3.37℃,孵育1~4h。 4.加入0.1mol/L氢氧化钠10μl/孔。 5.在多孔酶标仪上405nm处测光吸收度,将细胞培养板其中不含细胞,同样处理过的一孔作为空白对照,所测的每孔光吸收度可间接反应每孔中的细胞数。如在同样条件下作一细胞数的系列标准对照,以细胞数为X轴,光吸收度为Y轴,可作直线回归,可推算出每孔中的
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