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- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Immunohistochemical stain with eosin
- 库存:
大量
- 供应商:
上海信誉
产品用途: 科研ELISA检测试剂盒.提供实验代测服务.
产品询价:你可以通过电话,邮件,传真或在线客户方式询价
检测种属:大小鼠,人,猪,豚鼠,兔子,牛,羊,鸡,鸭Elisa试剂盒等种属
产品样本:体液,血清,血浆,细胞培养上清液,尿液,组织匀浆,心房水标本等。
贮藏条件:试剂盒保存2-8℃,有效期6个月
免疫组化用伊红染色液安全性:1,避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。4.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。5.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。6.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。7.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。8.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。9.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。10.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。11.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。12.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
免疫组化用伊红染色液说明
1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任免疫组化用伊红染色液何影响。
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文献和实验抗浓度和孵育时间 一抗孵育条件在免疫组化反应中最重要,包括孵育时间、温度和抗体浓度。一抗孵育温度有几种:4 ℃、室温、37 ℃,其中 4 ℃效果最佳;孵育时间:这与温度、抗体浓度有关,一般 37 ℃ 1-2 h,而 4 ℃过夜和从冰箱拿出后 37 ℃复温 45 min。具体条件还要摸索。 二抗孵育条件:二抗一般室温或 37 ℃ 30 min-1 h,具体时间需要摸索,而浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。但在免疫组化中我们一般先把二抗浓度和孵育时间先定下,然后去摸索一抗
抗原修复条件。 (2)固定方法不合理:可能由于不合理或不及时的固定导致抗原破坏,出现抗原弥散的现象,可尝试不同的固定剂或增加固定时间。 (3)离子相互作用影响抗原识别:尝试调整抗体稀释液的 pH 值或阳离子浓度。 Q6:切片边缘着色,怎么调整? (1)样本边缘粘贴不牢,边缘松脱漂浮在液体中:增加清洗次数或延长清洗时间。 (2)试剂未完全覆盖样本:边缘的试剂容易首先变干,浓度较中心高而致染色深。免疫组化笔画圈应距组织边缘大于 3~4 mm,试剂要充分覆盖组织,应超出组织边缘 2 mm。 Q7:阴阳
水质对免疫组化染色结果的影响显著: 在免疫组化染色过程中,实验用水一般用来配制两种试剂: 01 抗原修复液 包括柠檬酸(pH6.0) 、EGTA(pH 9.0) 和EDTA(pH9.0) 等种类,主要用于抗原修复。在免疫组化染色前,必须进行抗原修复,使抗原决定簇充分暴露,以便完全彻底地与抗体结合。未进行抗原修复的抗体即使阳性,其阳性细胞数量及染色强度要明显比进行过抗原修复的少、弱。电导率高的水因杂质存在容易影响溶液pH值,pH值或高或低都会造成抗原修复不佳,抗原决定簇不能完全彻底暴露
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