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KAPA HiFi HotStart ReadyMix Kit (6.25mL)
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嵘崴达
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致力于向国内生命科学研究人员提供合格产品和完善服务。
主要经营的试剂品牌:
Roche试剂,部分常用现货,周三定货,2-3周到货。
GE试剂,耗材,部分常用现货,周二,周五定货,3周左右。
SIGMA试剂,周一,五定货,3周左右到货。
R&D试剂,周一定货,3-4周到货。
THERMO试剂,部分现货,周三定货,2-3周到货。
ABCAM试剂,国内现货三天左右,期货四周左右。
Peprotech试剂,部分常用现货,周三定货,2-3周到货。
罗氏原料,请来电来邮咨询。
OXOID,BD培养基础货期八周左右,部分现货。
MCE激动剂,ACROS、ALFA、阿拉丁等生化试剂现货定购。
| 7958935001 | KK2602 | KAPA 热启动HiFi高保真酶预混液 (6.25mL) | KAPA HiFi HotStart ReadyMix Kit (6.25mL) |
| 8250936001 | KK2631 | KAPA 热启动HiFi高保真酶预混液 (50mL) | KAPA HiFi HotStart ReadyMix Kit (50mL) |
| 8477353001 | KK2625 | KAPA 热启动HiFi高保真酶预混液 (50mL) v2 | KAPA HiFi HotStart ReadyMix Kit (50mL) v2 |
| 7959052001 | KK2801 | KAPA Uracil+热启动HiFi高保真酶预混液 (1.25mL) | KAPA HiFi HotStart Uracil+ ReadyMix Kit (1.25mL) |
| 7959079001 | KK2802 | KAPA Uracil+热启动HiFi高保真酶预混液 (6.25mL) | KAPA HiFi HotStart Uracil+ ReadyMix Kit (6.25mL) |
| 7958978001 | KK2620 | KAPA 文库扩增试剂盒 (50反应) (含引物) | KAPA Library Amplification Kits + Primer Premix (50rxn) |
| 7958986001 | KK2621 | KAPA 文库扩增试剂盒 (250反应) (含引物) | KAPA Library Amplification Kits + Primer Premix (250rxn) |
| 7958994001 | KK2623 | KAPA 文库扩增引物 (250反应) | KAPA Library Amplification Primer Premix (250rxn) |
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文献和实验结果并非如此。如果大家需要使用热启动酶,建议向厂商索取的检测数据(如分子信标法检测,Ma et al., Anal Biochem, 2006),以证明其确实具有热启能力。2. 保真性保真性就是扩增过程中的错配率,对于 cDNA 克隆、文库构建的老师来说是尤为重要的参数。Taq 酶的保真性较低,而 Pfu、HiFi 等高保真酶具有 3’-5’ proofreading 功能,可以校正错配,保真度较高。保真性高于 Taq 酶 50 倍左右是比较常见的数值。我们也可以用 Lac I 分析的经典方法自己检测一下
Taq DNA 聚合酶活性的常用方法是在冰上配制 PCR 反应液,并将其置于预热的 PCR 仪。这种方法简单便宜,但并不能完成抑制酶的活性,因此并不能完全消除非特异性产物的扩增。 热启动通过抑制一种基本成分延迟 DNA 合成,直到 PCR 仪达到变性温度。包括延缓加入Taq DNA 聚合酶在内的大部分手工热启动方法十分烦琐,尤其是对高通量应用。其他的热启动方法使用蜡防护层将一种基本成分,如镁离子或酶,包裹起来,或者将反应成分,如模板和缓冲液,物理地隔离开。在热循环时,因蜡熔化而把各种成分释放
,切除标签,并通过质谱仪检测。如果你们实验室没有质谱仪,而又想开展多重分析,那么下面的一些方案可能适合你。 罗氏应用科学部的Light Cycler 480 Probes Master Mix能成功支持4重反应,甚至达到5重。这是一种即用型的反应预混液,包含了FastStart Taq 热启动型DNA聚合酶,它能减少非特异产物的形成,从而显著改善PCR的特异性和灵敏度。 Bio-Rad的iQ Multiplex Powermix能检测最多4个目标,即使它们的表达量相差106倍
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