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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
20
- 英文名:
KAPA UDI Primer Mixes
- 供应商:
上海臻诺生物科技有限公司
- 保存条件:
2~8°C
- 规格:
96*15μM
卡帕 UDI 入门的好处
- 兼容 2 通道和 4 通道 Illumina® 仪器,以及图案化和非图案化流通池。
- 易于整合到新的和现有的 Illumina 测序工作流程中。
- 经过功能测试,以确认高文库构建效率和最低水平的接头二聚体形成。
- 基于测序的QC测试减少了条形码交叉污染对索引错误分配的潜在影响。
- 使用非冗余(唯一)8核苷酸索引可减轻采用图案化流通池和排除扩增化学的Illumina测序仪上的索引错位(“索引跳跃”)。


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文献和实验,或缺少预期的PCR产物,最终导致假阳性或假阴性结果。 为此,QIAGEN提供了一种秘密武器,所有的多重PCR试剂盒都使用了一种特制的PCR缓冲液,它内含独特的添加剂MP因子。连同K+及其他阳离子,MP因子允许高效的引物退火和延伸,而与引物序列无关。MP因子提高了引物在DNA模板周围的局部浓度,并稳定了特异结合的引物。 Bio-Rad的qPCR预混液中也包含了专利的Sso7d融合蛋白技术,可帮助消除这个问题。Sso7d是一个小的双链DNA结合蛋白,能提高PCR聚合酶的速度
一般来讲,进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高,所以每个样品至少要做3个平行孔,以防在后面的数据分析中,由于Ct相差较多或者SD太大,无法进行统计分析。通常来讲,反应体系的引物终浓度为100-400mM;模板如果是总RNA一般是10ng-500,如果cDNA,通常情况下是1ul或者1ul的10倍稀释液,要根据目的基因的表达丰度进行调整。当然这些都是经验值,在操作过程中,还需要根据所用
Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
表达差异分析为例。实验材料分为对照组(CON)和处理组(TRT)。组内要有生物重复,可以数据分析此处理是否有统计意义。在材料收集过程中,尽量避免 RNA 的降解(尤其对于绝对定量的样品)。 一般传统的收集材料的方法是样品采集立刻液氮速冻,然后迅速转移到超低温冰箱保存,但这种方法携带不方便,由于对于异地取材。现在新技术的发展,也有一些非液氮类的样品储存液 ,比如百泰克的 RNAfixer 。 2. 引物设计 一般 real-time PCR 引物的设计遵循下面一些原则: 扩增产物长度在 80
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