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文献和实验,载玻片在使用前应清洗,新玻片应浸于有液态洗涤剂的清水中10~20分钟,然后用干净棉巾逐个擦拭,再以清水冲洗3~4次,晾干,最后用干净、柔软的棉巾擦亮备有。也可以95%乙醇浸泡5~10分钟,再擦干备有。备有的玻片每20~50张用纸包好后放入塑料袋内,保存于干燥环境中。溶血时要自然干燥再进行溶血,冲洗时水流不能太大,时间不能太长,10秒钟左右即可。
单细胞琼脂糖凝胶电泳Single Cell Agarose Gel Electrophoresis (SCGE)
。 二、玻片制备 : 1. 玻片磨砂。 2. 制备0.5%正常熔点琼脂糖(NMPA)和0.5%低熔点琼脂糖(LMPA)各20ml。用pH7.4 PBS配制。称0.1g溶于20mlPBS,如NMA与玻片附着不紧,可升高其浓度至0.65%。 铺第一层胶:0.5%NMPA 100μl于磨砂玻片面,迅速盖上盖玻片,室温>5min使其固化,即为第一层胶; 第二层胶:37℃ 0.5%LMPA 100μl+30-50μl(1-2×10
;投入流水略翻动, 1.2.9 流水洗10分钟,再入蒸馏水二次,取出沥水凉干待涂胶; 1.2.10 载玻片的磨砂面向上,平放在干净的纸上或桌面, 1.2.11 在载玻片的表面滴加1:10的多聚赖氨酸, 1.2.12 用另一载玻片覆盖其上,呈夹心饼干式结构,; 1.2.13 过夜待自然干燥后;揭开上方的载玻片,并将其涂胶面朝上再放置2小时使充分凉干; 1.2.14 收集涂胶载玻片,用笔标记涂胶面并注意其涂胶面方向一致
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