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文献和实验北京协和医学院阜外心血管病医院心外科心血管病国家重点实验室吴益和分享 实验中必须坚持的一些好习惯 1. 加入试剂之前，把它混匀一下，以免放置时间长了浓度不均。 2. 移液枪用完之后要归到最大计量的位置，防止久而久之弹簧失去弹性。 3. 所有的试剂都自己配，出了问题才好找原因一. 防止RNA酶污染的措施。 一、防止RNA酶污染的措施 1. 所有的玻璃器皿均应在使用前于180 ℃的高温下干烤6 h或更长时间。 2. 塑料器皿可用0.1% DEPC
浓度不佳：适当降低引物的浓度，并注意上下游引物的浓度配比。镁离子浓度过高：适当降低镁离子浓度，或选择更合适的mix试剂盒。模板有基因组的污染：RNA提取过程中避免基因组DNA的引入，或通过引物设计避免非特异扩增。5. 溶解曲线不止一个主峰引物设计不够优化：应避免引物二聚体和发夹结构的出现。引物浓度不佳：适当降低引物的浓度，并注意上下游引物的浓度配比。镁离子浓度过高：适当降低镁离子浓度，或选择更合适的 mix 试剂盒。模板有基因组的污染：RNA提取过程中避免基因组DNA的引入，或通过引物设计避免非特异
在细胞培养 过程中，经常少不了HEPES缓冲液。那么，HEPES缓冲液的配制和使用方法怎样呢?HEPES缓冲液是一种弱势，在开放式的培养条件中，若加入HEPES，可防止培养基内pH氧化升高，从而将PH维持在7.0左右。 HEPES分子 量为238.31，化学名：4-羟乙基哌嗪乙磺酸，分子式: C8H18N2O4S。 HEPES常用于生物缓冲剂，pH值缓冲范围：6.8-8.2，用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取 试剂盒及PCR诊断试剂
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