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分子生物学研究方法有以下几种分类:
一,DNA实验方案及应用
基因组DNA和质粒DNA的分离和定量注意事项
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二:RNA实验方案和应用
适用于包括RNAi、siRNA、miRNA、模拟物和抑制物等RNA的实验方案和应用
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三,PCR实验方案和应用
PCR技术全面指南,包括如何改善实验结果。
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四,全基因组扩增(WGA)实验方案和应用
全基因组扩增(WGA)实验方案和应用的概述
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五,二代测序(NGS)实验方案和应用
这里为您介绍二代测序的相关流程和应用。
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六,表观遗传学实验方案和应用
这里讨论表观遗传学的机理、DNA甲基化、以及相关研究应用。
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七,转染实验方案和应用
这里为您介绍成功转染的实验方案、应用和实用技巧。
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八,蛋白质实验方案和应用指南
蛋白质表达、分析、检测和的注意事项和实验方案
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九,动物细胞培养方案与应用
成功培养动物细胞的实验方案和技巧
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文献和实验。) 使用不同的聚合酶 通常用于体外转录的三种 RNA 聚合酶可以相互不同地转录给定的模板。当转录不能完成时,可以充分利用这种转录给定模板序列的不同能力。改变转录模板前面的聚合酶启动子序列是一种劳动密集型修复,因为它可能需要设计 PCR 引物或亚克隆。Ambion 具有可简化过程的载体和引物。pTRIPLEscript 系列载体具有串联排列的 SP6、T7 和 T3 启动子,这些载体特别适用于亚克隆转录模板。或者,Ambion 的无克隆启动子添加试剂盒 Lig'nScribe 可用于改变可 PCR 扩增
利用BLOCK-iT8482; RNAi技术,进行简单、高效的RNAi分析!
(siRNA)可以很容易地、特异地降解互补靶mRNA。 当前常用的用来在哺乳动物细胞中启动RNAi反应的方法包括以下几种:转染合成的siRNA寡核苷酸(siRNA oligonucleocides),体外转录后通过Dicer酶将长的双链RNA(dsRNA)切割成Diced siRNA (d-siRNA),或者导入能够表达siRNA的载体。在这些方法中,只有体外转录和切割(Dicing)能够形成d-siRNA 双链体的复杂池,继而经过转染进入细胞。这一过程可以很快产生结果,而无需再花费时间设计和检测
注意RNAse的防污染操作。 制备RNA探针的常用方法是构建含探针标记模板的重组质粒,将克隆子的转录区下游进行限制性酶切线性化后,进行体外转录的探针合成反应。当然,采用的质粒上必须含有SP6,T3或T7 RNA聚合酶的启动子序列。体外转录法合成的探针量很大,通常情况下,1μg的DNA模板进行反应,将得到20μg的标记RNA探针。 另一种更加直接的体外转录标记法,是先通过PCR方法制备DNA探针模板。扩增引物需要特殊设计,包含SP6,T3或T7 RNA聚合酶的启动
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