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文献和实验玻璃和石英表面的化学性质影响气相色谱仪毛细管柱的性能。各种金属氧化物在玻璃的表面形成路易斯酸作用点,可对醇、酮、氨和含 p 健的分子(如芳香化合物和烯烃)等局部电子密度高的化合物产生吸附。石英因金属杂质含量极小,表面不存在或很少存在酸化点,与玻璃相比具有天然惰性。 玻璃和石英表面的羟基是构成氢键型吸附的主要因素。表面羟基团之间氧原子的距离大于 0.31nm 时,就不能在两个羟基之间形成氢键。这类羟基的活性最大,对一些电子云密度高的化合物如胺、酮、醇和 p 键化合物产生吸附。 氢和氧
高效液相色谱仪键合相制备时,作为载体的硅胶预处理包括酸处理、中和与干燥等。 一、酸处理: 1、酸处理的目的: (1)洗去硅胶制备、运输和保存过程中进入的污染物。 (2)除去硅胶表面层的金属氧化物杂质,如 Na+、Ca2+、Al3+和 Fe3+等。 (3)使硅胶表面的硅氧烷键打开,形成尽可能多的自由羟基,有利于反应。 2、酸处理的方法: 用 0.1mol/L 的盐酸在 90℃ 下浸泡 24 h,或以 10% 的盐酸在回流状态处理 8 h。 二、中和
主要有以下几种类型: 1.双抗体夹心法测抗原 双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下: 1)将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。除去未结合的抗体及杂质。 2)加待检样本,孵育反应。样本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。除去其他未结合物质。 3)加酶标抗体,孵育反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与样本中受检抗原的量相关。 4)加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色,测知标本中抗原的量。 在临床
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