兔抗牛血清白蛋白（BSA亲和纯化）/RabbitAnti-B

胶体金标记物的制备

结合。为防止蛋白质与胶体金的聚合与沉淀，常用牛血清白蛋白，卵白蛋白，聚乙二醇或明胶作稳定剂。用Sephacryb S—400 （丙烯葡聚糖S—400 ）层析分离纯化胶体金蛋白标记物只适用于以BSA作稳定剂者。一、待标记蛋白质的准备（1）透析除盐：蛋白质溶液内应除去多余的电解质，不然过高的盐类物质会降低胶体金颗粒的Zeta电位，影响蛋白质的吸附，因此，标记之前必须彻底除盐。一般将蛋白质置入透析袋中然后直接放入双蒸水或极低浓度的盐水（0.005mol/L NaCl ， pH7.0）透析。（2）去除蛋白质中的

垂直电泳槽的使用

•如只运行一块凝胶，则需要把胶门（很厚的玻璃板）插入到电极空着的一边。将SDS-PAGE电泳缓冲液倒入凝胶三明治夹与胶门之间，直到缓冲液表面距离玻璃板上缘1cm（图 11）。检查是否有渗漏。将1升的SDS-PAGE电泳缓冲液倒入槽内凝胶组件的周围。 样品制备和装载： •将试管插入至制冷恒温金属浴（4℃），以解冻冷冻牛血清白蛋白（BSA）（1 mg/ml）样品。 然后，加入25μl 4X蛋白染料及75 μl的已解冻牛血清白蛋白溶液。 •把样品加样到凝胶中前, 请在恒温金属浴中以

Western Blot(免疫印迹法)步骤

10X TBS：24.2 g Trisbase, 80 g NaCl；用1N HCl调pH为 7.6 7. 甲醇 8. TBS/T缓冲液：1X TBS, 0.1% Tween-20 9. 封闭缓冲液(TBS/T)：1X TBS,0.1% Tween-20加5% w/v脱脂奶粉或BSA 10. 一抗的稀释：1X TBS,0.1% Tween-20 加 5% BSA ( 多抗) 或 5%脱脂奶粉( 单抗)。Note： 一般来说，BSA被推荐用于多克