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- 2025年10月05日
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TMB 经HRP 作用后，约40 分钟显色达顶峰，随即逐渐减弱，至2 小时后即可完全消退至无色。TMB 的终止液有多种，叠氮钠和十二烷基硫酸钠(SDS)等酶抑制剂均可使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间(12-24 小时)不褪，是目视判断的良好终止剂。此外，各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色，此时可用特定的波长(450nm)测读吸光值。酶标比色仪简称酶标仪，通常指专用于测读ELISA 结果吸光度的光度计。糖原合成酶激酶检测试剂盒酶标仪的主要性能指标有：测读速度、读数的准确性、重复性、精确度和可测范围、线性等等。优良的酶标仪的读数一般可精确到0.001，准确性为±1%，重复性达0.5%。酶标仪不应安置在阳光或强光照射下，操作时室温宜在15 -30℃ ，使用前先预热仪器 15-30 分钟，测读结果更稳定。
测读 A 值时，要选用产物的敏感吸收峰，如OPD用492nm 波长。有的酶标仪可用双波长式测读，即每孔先后测读两次，第一次在最适波长(W1)，第二次在不敏感波长(W2)，两次测定间不 移动ELISA 板的位置，最终测得的A 值为两者之差(W1-W2)。双波长式测读可减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
肉眼判断结果时，显色浅不易观察，影响结果的准确性，必须使用酶标仪检测，以保结果一致性。
糖原合成酶激酶检测试剂盒5.HooK效应影响
随着ELISA一步法的应用，一些标本中抗原含量过高，产生HooK效应。影响检测结果，采用同步稀释测定或使用线性范围高的两对半定量法可以减HooK反应的发生。
糖原合成酶激酶检测试剂盒6.干扰物质的影响
有人认为大约 40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质，可以不同程度影响检测结果;常见的干扰物质有：类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠Ig (s)抗体、交叉反应物质和其它物质等。如RF因子可与标记二抗的FC段法结合造成假阳性，补体从C1q活化，使一抗和酶标二抗的抗体分子发生变构，Fc的C1q分子结合点暴露出来，则补体C1q可将二者连接起来造成假阳性，采用56℃30分钟灭活补体可降低假阳性率，高浓度的AFP(如孕妇)，在储存过程中可能形成二聚体会导致本底过深影响检测结果。
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文献和实验Inhibition of Glycogen Synthase Kinase-3 Methods in Molecular Biology v468. chapter 5 Abstract There are two homologous forms of glycogen synthase kinase (GSK)-3, GSK-3a and GSK-3b, whichplay overlapping roles in the regulation of Wnt
糖原合成酶激酶 glycogen synthase kinase
使糖原合威酶（Ⅰ型）由 ATP而磷酸化，转化为依赖葡萄糖 -6-磷酸的非活性型（ D型）。此磷酸化反应，虽可在依赖环状 AMP的蛋白激酶或由 Ca2 而活化的磷酸化酶 b激酶催化下完成，但本酶的特异性强，只用 ATP仅对糖原合成酶磷酸化。存在于肌肉及肝中，与其它酶一起进行作用，但对糖原合成酶的不同的丝氨酸残基磷酸化，结果生成作用稍有不同的一些非活性型。磷酸化的非活性型，可由糖原合成酶 D磷酸酯酶的作用水解成活性型。
上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 人糖原合成酶激酶3 (GSK-3)ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 GSK-3 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 GSK-3与单抗结合，加入生物素化的抗人
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