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ELISA试剂盒组成结构
1、 血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。
5、 保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
此IBL试剂盒能用于小鼠血清,EDTA血浆,细胞上清中白介素-6的定量检测
四氢叶酸(THFA)ELISA试剂盒试剂盒成分
1 预包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 96T
2 酶标记抗体: (30倍浓缩)HRP标记抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 0.4mL x 1
3 标准品: 重组小鼠白介素-6 0.5mL x 2
4 EIA缓冲液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 30mL x 1
5 标记抗体稀释液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 12mL x 1
6 显色剂: TMB底物液 15mL x 1
7 终止液: 1N硫酸 12mL x 1 四氢叶酸(THFA)ELISA试剂盒
8 浓缩洗涤液: (40倍浓缩) 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 50mL x 1 操作说明 1实验所需器材(但试剂盒没有提供) 酶标仪(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及烧杯 去离子水 冰箱(4°C) 坐标纸(log/log) 吸水纸 试管(用于标准品稀释) 温育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性试剂管(用于浓缩酶标记抗体和显色剂)
四氢叶酸(THFA)ELISA试剂盒是用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。
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文献和实验一种水溶性 B族维生素,是蝶呤的衍生物。最初是从菠菜叶中发现的,其结构中有取代的喋呤、对氨基苯甲酸和谷氨酸 3个部分,在肝、酵母和绿色植物中最丰富。烹饪时或接触还原剂时被破坏。在细胞内的活性形式是四氢叶酸( tetrahydrofolicacid, THFA),它作为辅酶参与一碳基团的转移反应,在这些反应中,甲基( -CH3 )、甲酰基( -CHO)、亚甲基( -CH2 -)、甲川基( -CH=)或亚甲氨基( -CH=NH)等含一个碳原子的基团从一个分子转移到另一个分子
素B6则主要参与氨基酸的代谢。 (三)叶酸和维生素B12 叶酸由蝶酸(pteroic acid)和谷氨酸结合构成,在植物绿叶中含量丰富故名。在动物组织中以肝脏含叶酸最丰富。 食物中的叶酸多以含5分子或7分子谷氨酸的结合型存在,在肠道中受消化酶的作用水解为游离型而被吸收。若缺乏此种消化酶则可因吸收障碍而致叶酸缺乏。 叶酸在体内必须转变成四氢叶酸(FH4或THFA)才有生理活性。小肠粘膜、肝及骨髓等组织含有叶酸还原酶,在NADPH和维生素C的参与下,可催化此种转变
Raf 蛋白 Ras 结合结构域的简并进化库合成以及利用片段互补法快速筛选二氢叶酸还原酶的快速折叠且稳定的克隆
蛋白的结合将报告蛋白的两个片段连在一起,从而使报告蛋白具有可以检测的功能。例如,以鼠二氢叶酸还原酶(mDHFR) 作为报告蛋白,在大肠杆菌中利用简单的存活选择实验进行文库筛选的方法已经建立起来[ 32] 。与在所有的原核和真核细胞中相同,在大肠杆菌中,DHFR 的产物四氢叶酸是合成胸腺嘧啶、甘氨酸、丝氨酸和腺嘌呤所必需的,在原核生物中,它还是合成泛酸所必需的。因此,在不提供 DHFR 终产物的条件下,DHFR 的活性显然对于细胞生长和分裂是不可缺少的。用甲氧苄氨嘧啶(trim ethop rim,叶酸
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