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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 样本:
Cell culture supernatant, serum
- 标记物:
Osteoprotegerin/TNFRSF11B
- 适应物种:
Hu
- 应用:
VAL174
- 检测方法:
定量检测天然和重组人 Osteoprotegerin 的浓度
- 检测范围:
31.3-2000
- 规格:
96T
Human Osteoprotegerin/TNFRSF11B ELISA Kit
人 Osteoprotegerin/TNFRSF11B ValukineTM ELISA 试剂盒
目录号:VAL174
适用于定量检测天然和重组人 Osteoprotegerin 的浓度
科研专用,不可用于临床诊断
有效期详见试剂盒包装标签
Novus 试剂盒确保在你收货日期 3 个月内有效
背景
人骨保护素(Osteoprotegerin,OPG),又称肿瘤坏死因子受体超家族成员 11B(Tumor
necrosis factor receptor superfamily member 11B,TNFRSF11B),是肿瘤坏死因子受体
超家族中其中一个 60 kDa 大小的糖蛋白成员 (1-4)。这种细胞因子是由人肺、肝、脾、
前 列 腺 、 卵 巢 和 骨 髓 等 多 种 组 织 表 达 和 分 泌 的 同 源 二 聚 体 (5-10) 。 它 作 为
TNFSF11/RANKL 的诱导受体和核因子-κ B 受体的活化因子配体在骨稳态中发挥重要作
用 (11, 12)。因此,OPG 通过抑制破骨细胞分化和破骨细胞活化以及刺激破骨细胞凋亡
减少骨吸收。在青少年 Paget 病中发现了 OPG 缺乏症,这是一种罕见的常染色体隐性遗
传性骨病,表现在婴儿期和幼儿期,其特征是快速重塑编织骨,骨质减少,由于加速骨重
塑而导致的衰弱性骨折和畸形 (13, 14)。OPG 也可能在动脉钙化中发挥作用,研究发现
OPG 的高表达水平是心血管疾病和血管死亡率的独立危险因素 (15, 16)。
概述
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。小鼠抗人OPG抗体包被于微孔板上,样品和标准品
中的人OPG会与固定在板上的抗体结合,游离的成分被洗去;接着加入生物素化的抗人
OPG检测抗体进行孵育,洗涤去除未结合的物质后,加入链霉亲和素标记的辣根过氧化
物酶(Streptavidin-HRP)孵育。洗涤去除未结合的试剂后,加入TMB底物溶液(显色剂)。
溶液颜色与结合的目标蛋白成正比;加入终止液;用酶标仪测定吸光度。
B. 检测局限
仅供科研使用,不可用于体外诊断;
该试剂盒适用于细胞培养上清和人血清样本;
请在试剂盒有效期内使用;
不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用;
样本值若大于标准曲线的最高值,应将样本用试剂稀释液(1×)稀释后重新检测;
检测结果的不同可由多种因素引起,包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗板
技术、反应时间或温度、试剂盒的储存等。
B. 回收率
在细胞培养基样本中掺入检测范围内不同水平的人OPG,测定其回收率。回收率范围在
81.7-105.2%,平均回收率在96.5%。
在血清样本中掺入检测范围内不同水平的人OPG,测定其回收率。回收率范围在
88.7-102.6%,平均回收率在95.4%。
C. 灵敏度
人OPG的最低可测剂量(MDD)一般小于 2.05 pg/mL。
MDD是根据20个重复的零标准品孔的吸光度值的平均值加两倍标准差计算得到的相对应
浓度。
D. 校正
此ELISA试剂盒经由R&D Systems生产的高纯度Sf 21表达的重组人OPG / Fc嵌合体所校
正。
E. 线性
在不同类型样本中掺入高浓度的人OPG,然后用样品稀释液(1×)将样本稀释到检测范
围内,测定其线性。
G. 特异性
对50ng/mL浓度的下列因子进行了测定,未显示交叉反应性或干扰。
Recombinant human
CD40
TNF RI
TNF RII
重组人 TRANCE 和重组小鼠 TRANCE 在本试验中不发生交叉反应,但分别在浓度>250
pg/mL 和 500 pg/mL 时产生干扰。
含有 6250 pg/mL 重组小鼠 OPG 的样品读数为 1062 pg/mL(17%交叉反应)。
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文献和实验volume of 35 ml at room temperature. 2) Add the diluted buffy coat on top of 15 ml of Lymphoprep. 3) Centrifuge at 160 x g for 20 minutes at 20°C. Allow to decellerate without brakes. 4) Remove 20 ml of supernatant
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实验原理 This assay is a Sandwich ELISA based, sequentially, on: 1) capture of rat or mouse Growth Hormone molecules from samples to the wells of a microtiter plate coated by a pre-titered amount of anti-Growth Hormone
Isolation of c-Kit+ Human Amniotic Fluid Stem Cells from Second Trimester
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