- ￥3300
- Novus
- 11.7-750
- VAL105G
- 2026年02月13日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 样本：
Cell culture supernatant, serum, plasma
- 标记物：
TNF-α
- 应用：
VAL105G
- 检测方法：
ELISA Kit
- 检测范围：
11.7-750
- 规格：
96T
Human TNF-α Valukine ELISA Kit
人 TNF- ValukineTM ELISA 试剂盒
目录号：VAL105G
适用于定量检测天然和重组人肿瘤坏死因子-（TNF-）的含量
科研专用，不可用于临床诊断
17
产品信息及操作手册
人 TNF- ValukineTM ELISA 试剂盒
目录号：VAL105G
适用于定量检测天然和重组人肿瘤坏死因子-（TNF-）的含量
科研专用，不可用于临床诊断
有效期详见试剂盒包装标签
Novus 试剂盒确保在你收货日期 3 个月内有效
19
I. 背景
肿瘤坏死因子alpha（TNF-），又称为cachectin和TNFSF1A，是肿瘤坏死因子超
家族的原型配体（1）。它是一个多效因子，在炎症反应、免疫系统发育、细胞凋亡和
类脂代谢中起中心作用（2-5）。TNF- 也参与到许多病理过程，包括哮喘、克罗恩病、
类风湿关节炎、神经性疼痛、肥胖症、II型糖尿病、感染性休克、自身免疫和癌症（5-11）。
人TNF-是一个26 kDa的II型跨膜蛋白，由一个35个氨基酸（aa）胞内域、一个21
aa跨膜段和一个177 aa的胞外域（ECD）组成（12, 13）。在ECD区，人TNF-和猕猴
有97%氨基酸序列同源性，与牛、犬、棉鼠、马、猫、小鼠、猪、大鼠有71-92%的氨
基酸序列同源性。它可以由多种不同细胞如免疫细胞、上皮细胞、内皮细胞、肿瘤细胞
表达产生。TNF-在细胞内组装并在细胞表面表达形成非共价连接的同源三聚体（14）。
TNF-能诱导肿瘤细胞和病毒感染细胞的裂解，并与可溶性TNF RI结合，产生下游细胞
的跨膜转到信号（15, 16）。TACE/ADAM17可引起含有TNF-细胞膜的脱落从而释放
具有活性的TNF-细胞因子，它是由TNF-胞外可溶性结构构成的三聚体，分子量为55
kDa（17-19）。
TNF-有两个受体：TNF RI和TNF RII。TNF RI分子量为55-60 kDa，表达广泛（20,
21）；TNF RII分子量为78-80 kDa，仅限于造血细胞表达（22, 23）。两者都是以同源
三聚体形式表达（1, 24）；TNF-和TNF RI和TNF RII结合的亲和力相似，可促进NF-B
的激活（25-28）。然而，仅有TNF RI具有细胞死亡结构域，能引发细胞凋亡（3, 29）。
这两种可溶性受体都被释放到人的血清和尿液中，并能中和TNF-的活性（30-32）。
概述
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人TNF-单抗包被于微孔板上，样品和标准品
中的TNF-会与固定在板上的抗体结合，游离的成分被洗去；加入辣根过氧化酶标记的
抗人TNF-多抗，与结合在微孔板上的TNF-结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗
去；加入TMB底物溶液（显色剂），溶液颜色逐渐变成蓝色，加入终止液溶液变黄并且
停止变化。用酶标仪测定吸光度。
B. 检测局限
仅供科研使用，不可用于体外诊断；
该试剂盒适用于细胞培养上清、人血清和血浆样本；
请在试剂盒有效期内使用；
不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用；
样本值若大于标准曲线的最高值，应将样本用标准品稀释液（1×）稀释后重新检测；
检测结果的不同可由多种因素引起，包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗
板技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等。
III. 优势
A. 精确度
板内精确度（同一板内不同孔间的精确度）
已知浓度的三个样本，在同一板内分别检测20次，以确定板内精确度。
板间精确度（不同板之间的精确度）
已知浓度的三个样本，在不同板间分别检测20次，以确定板间精确度。
板内精确度 板间精确度
样本 1 2 3 1 2 3
平均值 (pg/mL) 380.6 90.0 23.4 381.9 89.9 23.4
标准差 14.0 3.1 1.3 13.2 3.0 1.2
CV% 3.7 3.4 5.7 3.5 3.4 5.3
B. 回收率
在不同类型样本中掺入检测范围内不同水平的人TNF-，测定其回收率。
样本类型 平均回收率% 范围%
细胞培养上清 (n=4) 103.8 98.7 – 106.5
血清 (n=3) 86.3 78.5 – 91.3
血浆 (n=3) 99.2 96.2 – 102.6
C. 灵敏度
人TNF-的最低可测剂量（MDD）一般小于 0.98 pg/mL。
MDD是根据20个重复的零标准品孔的吸光度值的平均值加两倍标准差计算得到的相对
应浓度。
此ELISA试剂盒经由R&D Systems生产的大肠杆菌表达的高纯度重组人TNF-蛋白所
校正。
NIBSC/WHO TNF-第3代国际标准品(12/154)作为效价标准，在本试剂盒中进行了评估。
NIBSC/WHO标准品是大肠杆菌来源的重组人TNF-。国际标准品(12/154)的剂量反应
22
曲线与Valukine 标准曲线平行。若要将使用Valukine Human TNF- kit获得的样本值转
换为NIBSC 12/154的近似单位，请使用以下公式：
NIBSC (12/154) approximate value (IU/mL) = 0.059 × Valukine Human TNF- value
(pg/mL)
E. 线性
在不同类型样本中掺入高浓度的人TNF-，然后用标准品稀释液（1×）将样本稀释到检
测范围内，测定其线性。
此ELISA法可检测天然及重组人TNF-蛋白。
将以下因子用标准品稀释液（1×）配制成 50 ng/mL的浓度来检测与人TNF-的交叉反
23
应。将50 ng/mL的干扰因子掺入中间范围的重组人TNF-对照品中，来检测对人TNF-
的干扰。没有观察到明显的交叉反应或干扰。
重组人蛋白 其他重组蛋白
CD40 TNF- 牛 TNF- 豚鼠 TNF-
CD40 Ligand TNF RII 犬 TNF- 小鼠 TNF-
Fas Ligand TRANCE 棉鼠 TNF- 猪 TNF-
LIGHT TRAIL 马 TNF- 大鼠 TNF-
TL1A 猫 TNF- 恒河猕猴 TNF-
重组人 Pro-TNF- 并不干扰实验结果，但是测试中观察到约1.5%的交叉反应。
重组人TNF RI在本实验中不发生交叉反应，但浓度为> 2.0 ng/mL时会对实验产生干扰。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验R&D Systems Quantikine® 人高分子量脂联素ELISA试剂盒
浆中HMW 脂联素的水平，而不需要对样品进行蛋白水解的预处理。关于脂联素相关产品的更多信息，请访问我们的网站www.RnDSystems.com/Adipocytokines。人HMW 脂联素水平的测定。利用Quantikine Human HMW Adiponectin/Acrp30ELISA Kit（货号 DHWAD0），我们分析了来自不同BMI 个体的血清中的HMW 脂联素平均水平，包括低BMI（平均BMI = 19.8 ；N=4），高BMI（平均BMI = 32.8 ；N=4）和超高BMI（平均
有替代前者的趋势。由于ABS-ELISA较普通ELISA多用了两种试剂，增加了操作步骤，在临床检验中ABS-ELISA应用不多。科研项目中检测微量的成分如细胞因子常采用本法。晶美分装ELISA KIT采用的方法：1， TORCH及传染病试剂盒（间接法），见2.2.32， TORCH-IgM捕获法特色：包被抗体，标记抗原原理：3， 细胞因子试剂盒采用的方法路线（ABC-ELISA）原理产品特色：采用ABC法，灵敏度更高，特异性更强。生物素抗体和酶联物是浓缩的，使用前需用相应的缓冲液稀释。酶联物可以通用
的原理用于分子诊断方面：TrimGen公司的KRAS Mutation Detection Kit在96孔板里一次能实现7/8个KRAS突变位点的检测。 另外基于相同原理的技术还有PPT-ELISA。这是用来筛截短突变的，相关文章见：1，Rapid screen for truncating ATM mutations by PTT-ELISA . 2，An ELISA-based high throughput protein truncation test
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
