Human Angiopoietin-like 3 (ANG

Human Angiopoietin-like 3 (ANGPTL3) Valukine ELISA Kit

人 Angiopoietin-like 3 (ANGPTL3) ValukineTM ELISA 试剂盒
目录号：VAL154
适用于定量检测天然和重组人 Angiopoietin-like 3 的浓度
科研专用，不可用于临床诊断

有效期详见试剂盒包装标签
Novus 试剂盒确保在你收货日期 3 个月内有效

背景
人血管生成素样蛋白3 (ANGPTL3)，也被称为血管生成素-5，是一种在结构上与血管
生成素有关的分泌型糖蛋白。成熟的人ANGPTL3包含一个N端螺旋结构域，一个C端纤维
蛋白原样结构域和一个连接区域。与其他血管生成素样蛋白不同，ANGPTL3几乎只在肝
脏特定表达 (1-4)。
ANGPTL3在脂质代谢中起重要作用。在人类中，全基因组关联研究表明，包含
ANGPTL3基因位点的序列，其变异情况与不同血浆的甘油三酯水平有关 (5, 6)。基于种
群的基因序列分析表明，ANGPTL3基因功能缺失突变，通常发生在血浆甘油三酯水平较
低的个体中 (7)。后来发现，ANGPTL3可以直接抑制脂蛋白脂肪酶(LPL)，该酶负责水解
循环中的甘油三酯 (8)，因此，ANGPTL3的存在会造成血浆甘油三酯升高。在小鼠中，
敲 除ANGPTL3基 因表 达可 导致 LPL 活 性升 高和 血脂 降 低。 当高 脂血 症 小鼠 用干 扰
ANGPTL3与LPL结合的单克隆抗体治疗时，其血清甘油三酯水平显著降低 (9, 10)。介导
ANGPTL3和LPL之间相互作用的功能域已被定位到ANGPTL3的N端区域，称为特异性表
位1 (11)。ANGPTL3的连接区易被蛋白酶裂解。当在其氨基酸221和224之间发生裂解时，
它会将蛋白质分离成一个含有N端螺旋状结构域的片段和一个含有C端纤维蛋白原样结构
域的片段。与全长蛋白质相比，N端片段具有降低血清甘油三酯的生物活性(12)。ANGPTL3
还能够抑制内皮脂肪酶，其，底物是高密度脂蛋白(HDL)。因此，ANGPTL3可以调节
血清HDL水平 (13, 14)。除脂质代谢外，ANGPTL3也参与血管生成。ANGPTL3的纤维蛋
白原样结构域可与整合素αVβ3相互作用，诱导内皮细胞黏附、迁移和新血管形成 (15)。
此外，ANGPTL3可能促进造血干细胞的扩增 (16)。据报道，与正常个体相比，具有某些
病理状况的患者血清ANGPTL3水平是各不相同的。例如，它在家族性高胆固醇血症、代
谢综合征和胰岛素抵抗中会升高。然而，在血液透析患者中却降低了 (17-20)。

概述
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人Angiopoietin-like 3抗体包被于微孔板上，样品
和标准品中的人Angiopoietin-like 3会与固定在板上的抗体结合，接着加入生物素化的抗
人Angiopoietin-like 3检测抗体进行孵育，洗涤去除未结合的物质后，加入链霉亲和素标
记的辣根过氧化物酶(Streptavidin-HRP)孵育。洗涤除未结合的试剂后，加入TMB底物溶
液（显色剂）。溶液颜色与结合的目标蛋白成正比；加入终止液；用酶标仪测定吸光度。
B. 检测局限
 仅供科研使用，不可用于体外诊断；
 该试剂盒适用于细胞培养上清样本和人血清样本；
 请在试剂盒有效期内使用；
 不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用；
 样本值若大于标准曲线的最高值，应将样本用试剂稀释液（1×）稀释后重新检测；
 检测结果的不同可由多种因素引起，包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗板
技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等。

A. 精确度
板内精确度（同一板内不同孔间的精确度）
已知浓度的三个样本，在同一板内分别检测20次，以确定板内精确度。
板间精确度（不同板之间的精确度）
已知浓度的三个样本，在不同板中分别检测20次，以确定板间精确度。

B. 回收率
在细胞上清样本中掺入检测范围内不同水平的人Angiopoietin-like 3，测定其回收率。回
收率范围在88.3-97.9%，平均回收率在92.1%。
在人血清样本中掺入检测范围内不同水平的人Angiopoietin-like 3，测定其回收率。回收
率范围在84.1-101.5%，平均回收率在91.3%。
C. 灵敏度
人Angiopoietin-like 3的最低可测剂量（MDD）一般小于6.2pg/mL。
MDD是根据20个重复的零标准品孔的吸光度值的平均值加两倍标准差计算得到的相对应
浓度。
D. 校正
此ELISA试剂盒经由R&D Systems生产的Sf21表达的高纯度重组人Angiopoietin-like 3蛋
白所校正。
E. 线性
不同的样本中含有或掺入高浓度的人Angiopoietin-like 3，然后用试剂稀释液（1×）将样
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本稀释到检测范围内，测定其线性。

G. 特异性
将以下因子配制成50 ng/mL的浓度来检测没有观察到明显的交叉反应或干扰。
Recombinant human Recombinant mouse
Angiopoietin-1 Angiopoietin-3
Angiopoietin-2 Angiopoietin-like 3
Angiopoietin-4 Angiopoietin-like 4
Angiopoietin-like 4
Integrin αVβ3
检测可识别N端剪切的人Angiopoietin-3 (aa 17-220)。